[发明专利]基于TiO2

说明书

本发明公开一种基于TiO₂金属有机框架制备的电致化学发光探针及其对呕吐毒素的竞争型免疫传感方法，特点是基于TiO₂金属有机框架材料的大比表面积及较高孔隙率，分别引入钌联吡啶信号探针及巯基‑环糊精；利用巯基‑环糊精与氟代香豆素硅酞菁的特异性识别，进一步引入其作为电致化学发光共反应试剂，最终制备了一种整合型电致化学发光探针；通过将该电致化学发光探针进一步功能化呕吐毒素抗体，运用于竞争免疫策略，实现对呕吐毒素的高灵敏、高稳定性检测。所制得的竞争型电致化学发光免疫传感平台，具有特异性强、灵敏度高、稳定性好、检测限低等优点，不仅可用于呕吐毒素（DON）的检测，还在临床应用方面具有较好的应用价值。

技术领域

本发明属于新型功能材料与生物传感检测技术领域，具体涉及一种基于TiO₂ MOFs纳米材料的整合型电致化学发光探针及其竞争型免疫传感器的制备方法及应用。

背景技术

间接竞争法，一种常用的分析方法，利用固相抗原与异相抗原去竞争结合一定量标记抗体，因此固相吸附的标记抗体与待测抗原的含量成反比，被广泛应用在荧光、电致化学发光、光电和电化学等领域。相比其他分析技术，电致化学发光具有灵敏度高、简单、快速反应等优点，其与竞争型分析技术的结合为生物传感器的发展提供了更广阔的应用前景。电致化学发光免疫传感器，利用抗原与抗体之间的特异性结合的一类生物传感器，具有灵敏度高、选择性好、操作简便、易于小型化、可连续快速、自动化检测分析等优点，具有良好的应用前景。本发明制备了一种基于TiO₂ MOFs纳米材料的整合型电致化学发光探针及其竞争型电致化学发光免疫传感器，并实现对呕吐毒素的高灵敏检测。

TiO₂ MOFs纳米材料因其独特的表面多孔结构、化学和物理稳定性、无毒性，优异的光散射和光捕获能力，使其成为电致化学发光传感器的理想材料。TiO₂ MOFs纳米材料结合了TiO₂介晶和金属有机框架的优点，使其具有更加优良的性能。本发明提供了一种基于TiO₂ MOFs纳米材料的整合型电致化学发光探针的制备方法及其对呕吐毒素的竞争型免疫传感方法，特点是基于TiO₂ MOFs纳米材料的大比表面积及较高孔隙率，分别引入钌联吡啶（Ru(bpy)₃²⁺）信号探针及巯基-环糊精（β-CD）；利用巯基-环糊精（β-CD）与氟代香豆素硅酞菁（F-couSiPcs）的特异性识别，进一步引入氟代香豆素硅酞菁（F-couSiPcs）作为电致化学发光共反应试剂，最终制备了一种整合型电致化学发光探针；通过将该电致化学发光探针进一步功能化呕吐毒素（DON）抗体，运用于竞争免疫策略，实现对呕吐毒素（DON）的高灵敏、高稳定性检测。所制得的竞争型电致化学发光免疫传感平台，具有特异性强、灵敏度高、稳定性好、检测限低等优点，不仅可用于呕吐毒素（DON）的检测，还在临床应用方面具有非常重要的应用价值及实际意义。

发明内容

本发明的目的之一是基于TiO₂ MOFs纳米材料，制备一种整合型电致化学发光探针，从而构建一种简易、快速、稳定性好，灵敏度高的竞争型电致化学发光免疫传感器及其制备方法。

本发明的目的之二是将该电致化学发光免疫传感器应用于呕吐毒素的高灵敏检测。

为实现发明目的，本发明采用如下技术方案：

1. 一种基于TiO₂ MOFs纳米材料的整合型电致化学发光探针的制备及其对呕吐毒素的竞争型免疫传感方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）玻碳电极（GCE）首先在铺有氧化铝粉末的麂皮上机械打磨抛光，用二次水洗去表面残留粉末，再移入超声水浴中清洗，直至清洗干净，最后依序用乙醇，稀酸和水彻底洗涤；