[发明专利]一种提高大肠杆菌中乙醇酸产率的方法有效
| 申请号： | 201810105170.4 | 申请日： | 2018-02-02 |
| 公开（公告）号： | CN108315289B | 公开（公告）日： | 2021-02-26 |
| 发明（设计）人： | 邓禹;马宁;张晓娟;毛银;赵运英 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12P7/42;C12R1/19 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214122 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 提高 大肠杆菌 乙醇 酸产率 方法 | ||
1.一种产乙醇酸的基因工程菌，其特征在于，所述基因工程菌在表达ycdW和aceAK基因的同时，敲除乳酸脱氢酶基因，并过表达柠檬酸合成酶；所述柠檬酸合成酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示；所述基因工程菌以pCDFDuet-1为载体；所述基因工程菌以大肠杆菌为宿主。
2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，所述大肠杆菌为E. coli BL21、E.coli MG1655、E. coli JM109、E. coli DH5α、E. coli TOP10。
3.一种构建权利要求1所述基因工程菌的方法，其特征在于，所述方法包括，将序列如SEQ ID NO.2所示的柠檬酸合成酶基因连接至载体，并转化至宿主细胞中。
4.一种提高大肠杆菌中乙醇酸产率的方法，其特征在于，在大肠杆菌中过量表达SEQID NO.1所示的柠檬酸合成酶。
5.一种乙醇酸的生产方法，所述方法是将权利要求1或2所述的基因工程菌接种至发酵培养基中，28~30℃发酵20~50 h。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基按g/L计，含有： Na2HPO4 6~8 ，KH2PO4 2~4，NH4Cl 0.5~1.5，NaCl 0.5~1，葡萄糖 8~10 ，MgSO4 0.15~0.3，CaCl2 0.1~0.2。
7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于，发酵过程控制发酵液pH为6.8~7.2，通气量1~1.2vvm。
8.权利要求1或2所述的基因工程菌，或权利要,3~7任一所述的方法在制备含乙醇酸的产品方面的应用。
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