[发明专利]一种银杏叶及其提取物与制剂的质量评价方法

说明书

一种银杏叶及其提取物与制剂的质量评价方法，其属于中药材的质量检测技术领域。本发明通过构建银杏化学成分的高效液相指纹图谱，借助一测多评方法，计算校正因子，实现对银杏中多种黄酮类化学成分含量的测定。该方法操作简便，稳定性好，既可以客观、全面、准确地评价银杏叶及其提取物与制剂的品质，并用于其质量控制，又可解决因对照品缺乏而无法客观合理地控制药材及其提取物或制剂质量的问题，对控制质量和保证疗效具有重要意义。

技术领域

本发明涉及中药材的质量检测技术领域，具体涉及一种基于高效液相指纹图谱和一测多评定量法的银杏叶及其提取物与制剂的质量评价方法。

技术背景

银杏叶为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶，具有活血化瘀，通络止痛、敛肺平喘，化浊降脂的功效。银杏化学成分丰富，包括黄酮类、内酯类和酚酸类等，其中银杏黄酮成分含量最多，组成多样，以总黄酮含量为24%的银杏提取物可改善心脑血管系统的各种疾病，且无副作用。

在银杏提取物与银杏制剂相关产品得到国内外医药领域的认可并获得大量市场需求的今天，银杏的质量评价方法至关重要。目前，在2015版《中国药典》银杏叶质量标准中：总黄酮含量是通过测定酸水解后槲皮素、山柰酚和异鼠李素的含量来评价和控制的，该方法不仅前处理繁琐，耗时长，而且不能充分反映黄酮类成分的真实和准确含量。此外，有研究报道了采用 HPLC-UV技术建立了银杏叶及其提取物中多种黄酮类化学成分的分析评价方法，但所测定指标对照品分离制备难度大、分析成本高，作为银杏药材质量控制方法不易推广。因此，为了充分控制好银杏叶药材及其提取物及其制剂的质量及临床安全性，开发一种简便易行、检测成本低廉，且可同时定量分析多种活性成分的分析方法，对于银杏及其提取物与制剂的质量控制具有现实意义。

为此，本发明提供了一种基于高效液相指纹图谱和一测多评定量法的银杏叶及其提取物与制剂的质量评价方法。将银杏中一种黄酮成分作为内参物，通过相对校正因子的计算，实现对银杏中多种黄酮类化学成分含量的测定。该方法操作简便，稳定性好，既可以客观、全面、准确地评价银杏叶及其提取物与制剂的品质，又可解决因对照品缺乏而无法客观合理地评价品质的问题，对控制质量和保证疗效具有重要意义。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种测定银杏中多种黄酮成分的含量测定方法，该方法既能准确地评价银杏叶及其提取物与制剂中总黄酮的质量，也可以解决因对照品缺乏而无法客观合理地控制中药材及其制剂质量的问题。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

提供一种银杏叶及其提取物与制剂的质量评价方法，该方法通过利用高效液相色谱技术以及一测多评方法，对银杏中多个黄酮类化学成分进行含量的测定，实现银杏叶及其提取物与制剂的客观、全面、准确地质量评价，黄酮类化学成分的含量测定是指银杏叶及其提取物与制剂的中多种黄酮对照品的含量测定，黄酮类化学成分的数量为8-16种。

具体包括以下步骤：

1）对照品溶液的配制：分别精密称取各黄酮对照品1-5mg置于容量瓶中，用 80-100%甲醇溶解定容，然后过滤，制得各单一对照品储备液，然后分别量取不同体积单一标准品溶液，混合稀释制成含有多种黄酮成分的混合样品，作为混合对照品溶液，备用；

2）供试品溶液的配制：精密称取银杏叶、银杏提取物或者银杏制剂，加入浓度为50-100%甲醇，超声或加热提取、过滤，取续滤液过0.45um或0.22um滤膜，得样品溶液；

3）校正因子RCF的计算：取步骤1）中制得的混合对照品溶液2-20μL，用高效液相色谱测定色谱图并计算峰面积，选择其中一个化合物作为内参物，分别计算该内参物和其他化合物之间的相对校正因子f_k/s。