[发明专利]一种银杏叶及其提取物与制剂的质量评价方法

权利要求书

1.一种银杏叶提取物的质量评价方法，其特征在于，该方法通过利用高效液相色谱技术以及一测多评方法，对银杏叶提取物中多个黄酮类化学成分进行含量的测定，具体包括下述步骤：

1）对照品

槲皮素-3-O-(2'',6-二-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷（1）、山奈酚-3-O-(2'',6-二-O-α-L-鼠李糖基)-β-D-葡萄糖苷（2）、山奈酚-3-O-β-槐糖苷（3）、槲皮素-3-O-芸香糖-7-O-葡萄糖苷（4）、3'-甲基-杨梅素-3-O-芸香糖苷（5）、槲皮素-3-O-葡萄糖苷（6）、槲皮素-3-O-(2-β-D-葡萄糖基-α-L-鼠李糖苷)（7）、山奈酚-3-O-芸香糖苷（8）、异鼠李素-3-O-β-D-芸香糖苷（9）、山奈酚-3-(2''-β-D-葡萄糖苷)-α-L-鼠李糖苷（10）、槲皮素-3-O-α-(6'''-p-香豆酰基-葡萄糖苷-β-1,4-鼠李糖苷)（11）、山奈酚-3-O-α-(6'''-p-香豆酰基-葡萄糖苷-β-1,2-鼠李糖苷)（12）；

2）供试品溶液的制备

精密称取银杏叶提取物粉末5.0mg于容量瓶中，加入甲醇溶解，超声5min，定容至20mL，摇匀，用0.22μm微孔滤膜过滤制得供试品溶液；

3）混合对照品溶液的制备

精密称取步骤1)中12种对照品各1.0mg，分别置于容量瓶中，加甲醇溶解并定容至2ml，摇匀，制成各对照品的贮备溶液，浓度为0.5mg/mL；精密量取各对照品的贮备溶液1.5mL，置于同一25mL的容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得混合对照品溶液；

4）校正因子的计算

取步骤3）中制得的混合对照品溶液10μL，用高效液相色谱测定色谱图并计算峰面积，选择6号对照品槲皮素-3-O-葡萄糖苷作为内参物，分别计算该内参物和其他化合物之间的相对校正因子f_k/s；

相对校正因子计算公式为：f_k/s＝f_k/f_s＝A_kC_s/(A_sC_k)；式中：A_s为内标物峰面积；C_s为内标物浓度；A_k为某待测组分k的峰面积；C_k为某待测组分k的浓度；

5）其他黄酮成分的测定

取步骤2）中制得的供试品溶液10μL，用高效液相色谱测定色谱图，按以下公式分别计算出其他黄酮成分的质量；

所述公式为：W_k=（W_s╳A_k)/(f_k/s╳A_s），W_k为被测组分的质量，W_s为内参物的质量，A_k为被测组分的峰面积，f_k/s为校正因子，A_s为内参物的峰面积；

高效液相色谱采用分析色谱柱：Gemini C₁₈；

流动相：以乙腈为流动相A，以0.1%甲酸水溶液为流动相B；

流动相梯度条件：流动相A、B的比例变化为：0-23min，16-17%A，23-25min，17-20%A，25-40min，20%A，40-45min，20-28%A，45-48min，28-35%A，48-60min，35%A。