[发明专利]一种快速提取检测植物组织中牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸的方法

权利要求书

1.一种提取植物组织中GGPP的方法，包括下述步骤：

1)用三元混合溶剂体系对植物组织进行提取，得到提取混合物；

2)对提取混合物进行离心处理，取上清液；

3)对上清液进行色谱分离，得到目标物GGPP；

步骤1)中，所述三元混合溶剂体系为环己醇、甲醇、氨水的三元混合体系，其中，氨水的质量浓度为28.0-30.0％；环己醇与甲醇、氨水的体积比依次为7-14：8：3-6；

所述三元混合溶剂体系的混合顺序依次为甲醇、环己醇和氨水；

所述色谱分离采用2.1mm×100mm的Agilent ZORBAX Eclipse plus C18 RRHD 1.8μm反相柱，pH耐受范围为2.0-9.0；

所述色谱分离中采用二元流动相：A，1mM甲酸铵水溶液；B，乙腈/异丙醇，9:1，v/v；

所述色谱分离采用梯度洗脱；

其中，B％为运行过程中流动相B所占(A+B)体积总和的比例。

2.一种检测植物组织中GGPP的方法，包括下述步骤：

1)用三元混合溶剂体系对植物组织进行提取，得到提取混合物；

2)对提取混合物进行离心处理，取上清液；

3)对上清液进行色谱分离并对分离得到的化合物进行质谱检测；

步骤1)中，所述三元混合溶剂体系为环己醇、甲醇、氨水的三元混合体系，其中，氨水的质量浓度为28.0-30.0％；环己醇与甲醇、氨水的体积比依次为7-14：8：3-6；

所述三元混合溶剂体系的混合顺序依次为甲醇、环己醇和氨水；

所述色谱分离采用2.1mm×100mm的Agilent ZORBAX Eclipse plus C18 RRHD 1.8μm反相柱，pH耐受范围为2.0-9.0；

所述色谱分离中采用二元流动相：A，1mM甲酸铵水溶液；B，乙腈/异丙醇，9:1，v/v；

所述色谱分离采用梯度洗脱；

其中，B％为运行过程中流动相B所占(A+B)体积总和的比例。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述方法步骤1)中，所述植物组织为：任何植物的根、茎、叶、花、果实、种子。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述植物组织为：丹参毛状根。

5.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述方法步骤1)中，所述提取中，三元混合溶剂体系与植物组织的配比为400-450μL：17.5-22.5mg；

所述提取为快速浸提；

所述提取的时间为1-3min。

6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤1)中在对植物组织进行提取前，还包括对植物组织进行预处理的操作；

所述预处理的操作为：将植物组织干燥成干燥样品，再将干燥样品粉碎，得到植物组织干粉。

7.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述方法步骤2)中，所述离心的条件为：12000-12700rpm/min离心10-30分钟。

8.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：步骤3)中，所述流动相的流速为0.2-0.4mL，柱温控制在25-40℃，进样量为1-20μL。

9.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述质谱检测采用Agilent高分辨质谱Q-TOF 6540进行检测，fragmentor电压为120-135V。