[发明专利]一种酶法制备乙酰辅酶A的方法有效
| 申请号： | 201810095650.7 | 申请日： | 2018-01-31 |
| 公开（公告）号： | CN108410896B | 公开（公告）日： | 2020-02-21 |
| 发明（设计）人： | 乐易林;孙建中;倪黎 | 申请（专利权）人： | 江苏大学 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70;C12P19/32;C12N9/02 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 212013 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 法制 乙酰 辅酶 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种酶法制备乙酰辅酶A的方法，其特征在于，所述方法中使用的酶为丙酮酸铁氧化还原蛋白酶；包括以下步骤：
（1）制备丙酮酸铁氧化还原蛋白酶：
用引物5’-TGTAAGGAGGTGCAATCGATG-3’ 和5’-CCCAAGCTTTCATCTGATC GGTTTGTCTTTTG-3’，从新阿波罗栖热袍菌（
（2）合成乙酰辅酶A：
配置 pH8.0 的反应液，其中，反应液的组成及其浓度为：2.0mM 丙酮酸钠，1mM TPP，1mM CoA，1mM MgCl2，5mM 甲基紫精，1mM DTT，20mM 的 Tris-HCl 缓冲液，将反应液加入到密封瓶中，通入氩气 5min 后，向上述反应液中加入 0.25μg/μL丙酮酸铁氧化还原蛋白酶，将得到的混合反应液置于 90℃水浴锅中反应 2min，得到含有乙酰辅酶 A 的混合液。
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