[发明专利]白细胞分类用样本的预处理试剂及方法

说明书

一种白细胞分类用样本的预处理试剂，含有溶血剂，所述溶血剂的活性成分主要由有机酸及高分子非离子表面活性剂组成，所述有机酸选自甲酸、乙酸及丙酸中的至少一种，所述高分子非离子表面活性剂选自聚乙烯吡咯烷酮及聚乙二醇中的至少一种。该样本预处理试剂用于处理用于白细胞分类的样本时，其红细胞裂解效率高、白细胞破坏性小且处理后样本保存时间长。

技术领域

本发明涉及检测分析技术领域，特别是涉及一种白细胞分类用样本的预处理试剂及方法。

背景技术

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是七十年代发展起来的一种集光学、流体、电子、机械、计算机、免疫等多学科于一体的分析技术。目前在医学领域主要用于淋巴细胞亚群分析和白血病免疫分型等项目的检测。在白细胞分类分析时，临床血液样本或骨髓样本中往往含有大量的红细胞，检测时它们会增加细胞信号的背景，干扰白细胞的分类，因此在分析前要使用溶血剂将样本中的红细胞予以裂解，以消除红细胞对于流式细胞分析的影响。

目前已公开的一种用于流式细胞分析的单一溶血剂，主要由甲醛等短链的脂肪醛、柠檬酸钠等弱酸性的碱或碱土金属盐以及二甘醇等多羟基醇组成。由于弱酸性的碱土金属盐裂解红细胞的能力较弱，因此该溶血剂的溶血时间较长，通常要大于10分钟，溶血剂处理后样本的细胞碎片也较多，后续还需洗涤才能完全去除。此外，由于低浓度甲醛具有挥发性，因此溶血剂开瓶后的保存时间也较短，通常只有30天。为了防止低浓度甲醛挥发较快，基于该专利的商品化溶血剂被制成了10倍的浓缩液，在使用前需要用水进行稀释，才能使用。

另一用于全血白细胞分析的溶血系统，该系统包括溶血剂和终止剂两种试剂。溶血剂的主要成分包括甲酸等强酸和皂苷，终止剂的成分主要是碱土金属盐。该溶血系统可以在5-10秒内完成红细胞的裂解。但由于溶血剂的强酸对白细胞过度破坏，所以会导致细胞散射光信号的变异系数(CV％)较大。

生物学实验中的常用溶血剂的主要成分就是氯化铵。它的最主要优点是溶血力弱，对白细胞的结构和功能破坏小。但它的缺点也很明显，即溶血时间过长，通常要15～30分钟。另一单一溶血剂，主要成分包括氯化铵等非四价铵盐、甲醛等短链脂肪醛、非磷酸盐缓冲液以及皂苷等表面活性剂等。由于使用的氯化铵和皂苷的红细胞裂解能力较弱，因此在室温条件下需要更长的溶血时间，约20秒-10分钟。若要进一步缩短溶血剂时间，还需配备38±2℃的孵育设备。

已公开的另一种流式细胞分析试剂，其成分主要有脂蛋白、皂苷等红细胞裂解剂和防腐剂。由于皂苷的红细胞裂解能力较弱，因此溶血剂处理后样本的细胞碎片较多，后续还需洗涤才能完全去除。此外，脂蛋白的来源有限，价格也较高。

发明内容

基于此，有必要提供一种红细胞裂解效率高、白细胞破坏性小且处理后样本保存时间长的白细胞分类用样本的预处理试剂及方法。

一种白细胞分类用样本的预处理试剂，含有溶血剂，所述溶血剂的活性成分主要由有机酸及高分子非离子表面活性剂组成，所述有机酸选自甲酸、乙酸及丙酸中的至少一种，所述高分子非离子表面活性剂选自聚乙烯吡咯烷酮及聚乙二醇中的至少一种。