[发明专利]具有DPP-IV抑制功能的羊乳清蛋白肽、其制备方法及其应用有效
申请号: | 201810077889.1 | 申请日: | 2018-01-26 |
公开(公告)号: | CN108314705B | 公开(公告)日: | 2020-07-14 |
发明(设计)人: | 侯艳梅;罗永康;刘跃辉;阿尔弗雷德亨德里克曼;刘柯驿;尹亚军;吴红 | 申请(专利权)人: | 海普诺凯营养品有限公司;澳优海普诺凯(荷兰)乳业公司 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/16;C07K1/20;C07K1/36;A23L33/18;A61K38/08;A61P3/10 |
代理公司: | 长沙七源专利代理事务所(普通合伙) 43214 | 代理人: | 周晓艳;张文君 |
地址: | 410215 湖南*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 具有 dpp iv 抑制 功能 羊乳清 蛋白 制备 方法 及其 应用 | ||
1.一种具有DPP-IV抑制功能的羊乳清蛋白肽,其特征在于:包括混合肽,所述混合肽由氨基酸序列为Ile-Pro-Ala-Val-Phe-Lys-Ile-Asp的肽、氨基酸序列为Pro-Pro-Ala-Ser-Glu-Val-Val-Lys-Pro的肽以及氨基酸序列为Val-Val-Pro-Pro- Phe-Leu-Gln的肽混合而成。
2.根据权利要求1所述的具有DPP-IV抑制功能的羊乳清蛋白肽,其特征在于:所述混合肽在所述羊乳清蛋白肽中的质量百分数为82-90%;
所述氨基酸序列为Ile-Pro-Ala-Val-Phe-Lys-Ile-Asp的肽所占质量百分数为20-26%;
所述氨基酸序列为Pro-Pro-Ala-Ser-Glu-Val-Val-Lys-Pro的肽所占质量百分数为26-35%;
所述氨基酸序列为Val-Val-Pro-Pro-Phe-Leu-Gln的肽所占质量百分数为29-37%。
3.一种如权利要求1-2任意一项所述的具有DPP-IV抑制功能的羊乳清蛋白肽的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
第一步、羊乳清蛋白粉加水,先在一定温度下搅拌,再经动态超高压微射流处理,最后得到羊乳清蛋白液;所述羊乳清蛋白粉的质量与水的质量配比为12-15:1;一定温度下处理具体是:在温度为40℃-55℃条件下搅拌30-80分钟;
第二步、将第一步所得羊乳清蛋白液进行超声处理,得到蛋白液;超声处理具体是:将第一步所得羊乳清蛋白液升温至65℃-75℃,在超声频率为60-100kH条件下处理15-25分钟;
第三步、向第二步所得蛋白液中加入复合蛋白酶进行酶解,所述复合蛋白酶的重量为蛋白液中乳清蛋白总重量的0.6-1.2%;所述复合蛋白酶由碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶组成,所述碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶的质量配比为1-2:1:1;酶解具体是:在温度为55℃-60℃条件下酶解1.0-4.0小时;在温度为90℃-100℃条件下保温10-20分钟,冷却至65℃-75℃后,通过硅藻土进行过滤分离,收集分离液;
第四步、将第三步所得分离液通过二步超滤法处理,收集滤液;超滤法处理具体是:先将分离液用孔径为能够分离5000D的膜超滤,再用孔径为能够分离2000D的膜超滤,最后得到滤液,滤液包括分子量小于2000D的蛋白肽;
第五步、将第四步所得滤液过柱分离,收集洗脱峰,即得具有DPP-IV抑制功能的羊乳清蛋白肽,具体是:将滤液过柱分离,洗脱液为去离子水,洗脱峰在280nm下进行检测,收集第2个洗脱峰,浓缩、冷冻干燥得到羊乳清蛋白肽;再用RP-HPLC反相高效液相色谱进行分离,收集经过RP-HPLC反相高效液相色谱分离中第11-12分钟洗脱出来的肽液,进一步纯化,得到具有DPP-IV抑制功能的羊乳清蛋白肽。
4.一种如权利要求1-2任意一项所述的具有DPP-IV抑制功能的羊乳清蛋白肽的应用,其特征在于:用于制备具有DPP-IV抑制功能的药物。
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