[发明专利]具有治疗急慢性肾盂肾炎和前列腺增生功效的中药复方的质量检测方法

说明书

本发明公开了一种具有治疗急慢性肾盂肾炎和前列腺增生功效的中药复方的质量检测方法，该方法包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备；(2)内标溶液的制备；(3)供试品溶液的制备；(4)线性关系考察；(5)供试品溶液的检测。本发明根据中药复方中皂苷、生物碱等8种化合物的结构及其性质特点，通过大量实验筛选出最佳的色谱柱、流动相组成，洗脱程序、流速，色谱柱、质谱等分析条件。经多次实验验证表明，本发明能够同时检测皂苷、生物碱等8种化合物，该方法检测灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确地进行检测评价，对控制质量和保证临床的安全有效具有重要意义。

技术领域

本发明涉及一种中药制剂的质量控制方法，具体涉及一种具有治疗急慢性肾盂肾炎和前列腺增生功效的中药复方的质量检测方法。

背景技术

肉桂，黄柏和知母制备成的滋肾通关胶囊是江苏省中医院的院内制剂，具有滋肾清热、化气通关的功效。滋肾通关胶囊在除下焦湿热，助膀胱气化，具有滋肾清热，化气通关之功效，临床用于治疗急慢性肾盂肾炎、前列腺增生等，疗效确切。本发明中医辩证理论为：方中知母苦寒，上清肺热而降火，下润肾燥而滋阴；黄柏苦寒，泻膀胱相火，补肾水不足，清下焦湿热，二药相须而行滋肾阴之亏损，兼泻妄动之相火，相得益彰；少佐肉桂温通血脉，补命门之火，以助膀胱气化，增强利尿通关之功，药性虽温，起反佐之效，三药同用，相反相成。

现代药理研究显示，知母中的皂苷成分具有多种药理活性，是其主要活性成分。其中知母皂苷BII和AⅢ在知母药材中含量均较高，有改善记忆障碍，诱发肿瘤细胞的凋亡，抗血栓等活性，是治疗老年痴呆，心血管疾病，抗癌的主要成分；知母皂苷中的芒果苷是知母清热作用的主要成分。黄柏具有抗菌、抗真菌、抗炎、抗肝炎、抗肾炎、抗溃疡、抗氧化、抗痛风、降血压、降血糖、抗肿瘤、抗心力衰竭、抑制细胞免疫等作用。生物碱类成分是主要药理活性成分。其中小檗碱、药根碱的主要表现的药理活性是抗菌抗炎活性。

本发明中药制剂成分复杂，依靠单一的检测方法，无法全面客观的检测其质量。因此，为了充分控制好滋肾通关胶囊的临床有效性和安全性，维护患者的利益，很有必要在现有技术的基础之上研究设计出能准确全面检测有效成分，方法简单、高效，专属性好，灵敏度高的超高效液相色谱-串联质谱联用技术(UPLC-MS/MS)。

发明内容

发明目的：本发明的目的是解决现有技术的不足，经过大量实验筛选，采用超高效液相色谱-串联质谱联用技术(UPLC-MS/MS)，该检测方法可以同时检测本发明滋肾通关胶囊中的皂苷、生物碱等8种活性化合物。该方法检测灵敏度高，稳定性好，可以客观、全面、准确地评价本发明滋肾通关胶囊中药制剂的质量，对控制质量和保证疗效具有重要意义。

技术方案：为了实现以上目的，本发明采取的技术方案为：

一种具有治疗急慢性肾盂肾炎和前列腺增生功效的中药复方的质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备

分别精密称取知母皂苷BII、知母皂苷AⅢ、黄柏碱、药根碱、盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、芒果苷和新芒果苷的对照品，置于容量瓶中，分别用乙腈定容至刻度，制得单个对照品储备液；

精密吸取适量知母皂苷BII对照品储备液、知母皂苷AⅢ对照品储备液、黄柏碱对照品储备液、药根碱对照品储备液、盐酸小檗碱对照品储备液、盐酸巴马汀对照品储备液、芒果苷对照品储备液、新芒果苷对照品储备液，定容至容量瓶，得混合对照品溶液；

(2)内标溶液的制备

分别精密称取右美沙芬和薯蓣皂苷对照品适量，置于容量瓶中，用乙腈定容至刻度，制得混合内标储备液，保存，备用；

精密量取混合内标储备溶液适量至容量瓶中，用体积比为1：3的乙腈和0.2％甲酸水定容至刻度，得右美沙芬和薯蓣皂苷的混合内标溶液；

(3)供试品溶液的制备