[发明专利]一种快速响应的新型一氧化氮的探针及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种快速响应的一氧化氮的探针，其特征在于：具有如下结构式：

2.根据权利要求1所述的快速响应的一氧化氮的探针的制备方法，其特征在于，所述的荧光探针XNO的制备方法包括如下步骤：

2.1 XNO1：将50-200mg双光子萘酚衍生物XH00C、80-200mg 2-氨基苯酚、5-16μL对甲苯磺酸，依次加入到3-8mL无水乙醇中，在惰性气体保护条件下95℃回流4小时，反应结束后冷却至室温，抽滤，然后用无水乙醇洗涤3-6次，得到纯度较高的橙红色目标产物XNO1荧光探针，反应式如下：

2.2 XNO2：将50-200mg双光子萘酚衍生物XH00C、80-200mg 4-氨基苯酚、5-16μL对甲苯磺酸依次加入到3-8mL无水乙醇中，在惰性气体保护条件下95℃回流4小时，反应结束后冷却至室温，抽滤，然后用无水乙醇洗涤3-6次，得到纯度较高的暗红色目标产物XNO2荧光探针，反应式如下：

3.根据权利要求2所述的快速响应的一氧化氮的探针的制备方法，其特征在于，所述的双光子萘酚衍生物XH00C和氨基苯酚的摩尔比均为1：1.5。

4.根据权利要求2所述的快速响应的一氧化氮的探针的制备方法，其特征在于，所述的双光子萘酚衍生化合物XH00C的制备方法如下：

(1)XH3：在冰浴条件下，将0.5-2.0g XH2溶于DCM中,将0.4-2.5mL TiCl₄后搅拌20-60min，然后将0.2-0.81mLCH₃CHCl₂缓慢加入到上述混合液中，25℃搅拌8-12小时，使用NH₄Cl水溶液萃取，有机层被萃取后旋干，柱层析得到黄色固体XH3；

(2)XH00C：在冰浴条件下，将0.5-1.5g XH3溶于DCM中,缓慢加入0.5-2.5mL BBr₃,25℃搅拌1-4小时,加入碳酸氢钠水溶液至无汽包产生，常温搅拌30min，然后用DCM萃取，有机层旋干，柱层析得到黄色固体XH00C，反应试如下：

5.根据权利要求4所述的快速响应的一氧化氮的探针的制备方法，其特征在于：所述步骤(1)中XH2、CH₃CHCl₂的摩尔比为1:3，条件为冰盐浴投料，后处理用1M的NH₄Cl水溶液萃取。

6.根据权利要求4所述快速响应的一氧化氮的探针的制备方法，其特征在于：所述步骤(2)中粗产物XH3可以直接进行下一步，且加料条件为冰盐浴，后处理在冰浴中进行。

7.一种如权利要求1所述的快速响应的一氧化氮的探针的应用，该应用不包含疾病的诊断和治疗方法，所述的荧光探针XNO1，XNO2均应用于生理体系中精确检测细胞内的一氧化氮。