[发明专利]一种检测沙门氏菌的生物传感器

说明书

本发明提供了一种检测沙门氏菌的生物传感器，包括适配体（Apt）、模板（T）、发卡探针1（H1）、发卡探针2（H2）、血红素、钾离子（K⁺）、半胱氨酸、修饰拉曼染料的纳米金和缓冲液，可利用表面拉曼增强检测食品中沙门氏菌。本发明利用了特异型好，检测的灵敏度高；反应条件温和，反应速度快；与其他光学检测手段相比，该检测方法操作简便、检测周期短；检测过程在均相中实现的，降低了操作的复杂程度；无需酶参与有效的降低了生物传感器的工艺成本，适用于产业化中低成本的要求。

技术领域

本发明涉及一种基于SERS信号传导的检测沙门氏菌的生物传感器，特别涉及一种基于杂交链式反应放大（HCR）及存在半胱氨酸时G-四联体DNA酶抑制等离子体共振耦合及SERS信号传导检测沙门氏菌的生物传感器，属于生物传感器技术领域。

背景技术

沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌，是革兰氏阴性、细胞内寄生的一种肠道菌。该菌广泛存在于自然界中，不但能引起家畜家禽及其他动物发生急性、慢性或隐性感染，而且还能通过污染食物导致人的食物中毒，对人类造成很大威胁。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。沙门氏菌每年会导致约四万美国人病倒，约600人死亡。在我国沙门氏菌是食物中毒中最常见的致病菌，占食物中毒的第一位。沙门氏菌病的临床症状主要包括头痛、腹痛、发热等，死亡率在1 %，对人危害很大。

目前报道的检测沙门氏菌的方法包括传统的培养方法、酶联免疫法、PCR技术等。传统的沙门氏菌检测方法检测周期长达一周，工序繁琐，设备昂贵等，这远远不能满足要求。因此，食品工业急需一种快速、准确、简便、微量的分析方法，以对食品中的沙门氏菌进行检测。近几年，DNA生物传感检测技术凭借其高灵敏性和特异性得到广泛的关注。其中，随着纳米科学研究的不断深入和纳米技术构建技术的飞速发展，表面增强拉曼散射（SERS）技术的基础理论研究日益成熟，它在生物学、医学以及材料学等领域中所扮演的角色越来越重要。相对于其他几种光学检测手段，SERS技术具有显著的优势，超高的灵敏度、窄的带宽、丰富的谱图信息、无需样品预处理等。然而，目前尚无基于SERS技术检测沙门氏菌的生物传感器。

发明内容

为了解决以上现有技术中检测沙门氏菌的方法特异性和灵敏度都比较低、成本高、检测周期长的问题，本发明提供了一种特异性和灵敏度高、成本低、检测速度快的基于SERS信号传导的检测沙门氏菌的生物传感器。

本发明的另一目的是提供一种上述生物传感器在检测沙门氏菌中的应用与方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案。

一种检测沙门氏菌的生物传感器，包括适配体（Apt）、模板（T）、发卡探针1（H1）、发卡探针2（H2）、血红素、钾离子（K⁺）、半胱氨酸、修饰拉曼染料的纳米金和缓冲液；

所述适配体的序列如SEQ No.1所示；

所述模板的序列如SEQ No.2所示；

所述H1的序列如SEQ No.3所示；

所述H2的序列如SEQ No.4所示。

所述H1的终浓度优选为0.4-1.4 μM，优选为0.4-1 μM。

所述H2的终浓度优选为0.4-1.4 μM，优选为0.4-1 μM。

所述血红素的终浓度优选为0.01-10 μM，优选为0.01-1 μM。

所述生物传感器中钾离子（K⁺）由缓冲液提供，所述缓冲液pH为7.0-7.6。