[发明专利]一种检测沙门氏菌的生物传感器有效
申请号: | 201810072407.3 | 申请日: | 2018-01-25 |
公开(公告)号: | CN108103146B | 公开(公告)日: | 2021-08-17 |
发明(设计)人: | 刘素;冷雪琪;王玉;黄加栋 | 申请(专利权)人: | 济南大学 |
主分类号: | C12Q1/682 | 分类号: | C12Q1/682;C12Q1/06;G01N21/65 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所 37218 | 代理人: | 李桂存 |
地址: | 250022 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 沙门氏菌 生物 传感器 | ||
1.一种检测沙门氏菌的生物传感器,其特征在于,包括适配体、模板、发卡探针1、发卡探针2、血红素、钾离子、半胱氨酸、修饰拉曼染料的纳米金和缓冲液;
所述适配体的序列如SEQ No.1所示;模板的序列如SEQ No.2所示;发卡探针1的序列如SEQ No.3所示;发卡探针2的序列如SEQ No.4所示。
2.根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,生物传感器中钾离子由缓冲液提供,所述缓冲液pH为7.0-7.6。
3.根据权利要求1所述的生物传感器,其特征在于,拉曼染料为2-硝基苯硫酚、4-乙酰氨基苯硫酚或4-邻巯基苯甲酸中任意一种。
4.根据权利要求1-3任一所述的生物传感器,其特征在于,所述发卡探针1的终浓度为0.4-1.4 μM;发卡探针2的终浓度为0.4-1.4 μM;血红素的终浓度为0.01-10 μM。
5.一种利用如权利要求1所述的生物传感器的检测食品中沙门氏菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将适配体和模板杂交为探针;
(2)将步骤(1)所得探针、H1、H2、5倍缓冲液加入离心管中,再分别加入待测液和系列浓度的沙门氏菌悬液,混匀后37℃恒温反应;
(3)将步骤(2)所得溶液加入修饰拉曼染料的纳米金、半胱氨酸、血红素,混匀后37℃恒温反应;
(4)将步骤(3)的反应液检测拉曼强度,根据系列浓度沙门氏菌悬液的强度作标准曲线,计算回归方程,然后根据待测液拉曼强度计算待测物中沙门氏菌的浓度。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(1)中杂交步骤为95 ℃下变性后自然冷却退火杂交。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(2)中反应时间为30 min。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(3)中的反应时间为1-2 h。
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