[发明专利]一种羊乳清蛋白免疫调节肽、其制备方法及其应用

权利要求书

1.一种羊乳清蛋白免疫调节肽，其特征在于：包括Thr-Gly-Pro-Ile-Pro-Asn-Ser-Leu和Ala-Pro-Glu-Pro-Glu-Val-Phe两条肽。

2.根据权利要求1所述的羊乳清蛋白免疫调节肽，其特征在于：还包括一条肽：Arg-Phe-Phe-Asp-Asp-Lys-Ile-Ala。

3.一种如权利要求1所述的羊乳清蛋白免疫调节肽的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

第一步、将羊乳清蛋白加水溶解后，调节pH值至1.5-4.0，加入胃蛋白酶进行水解反应，得到水解反应体系；

第二步、保持水解反应体系的温度不变，调整水解反应体系的pH值至6.0-8.0，加入胰蛋白酶，继续水解1-2h；升高温度继续水解得到羊乳蛋白水解液；

第三步、将羊乳蛋白水解液冷却后离心取上清，收集滤过液，冻干，得到羊乳蛋白水解物粉末；

第四步、采用凝胶色谱柱和高效液相色谱对羊乳蛋白水解物进行分离纯化，得到羊乳蛋白免疫调节肽；

其中：胃蛋白酶按照每100g羊乳清蛋白添加400KU蛋白酶的比例加入；胰蛋白酶按照每100g羊乳蛋白添加500KU蛋白酶的比例加入。

4.一种如权利要求2所述的羊乳清蛋白免疫调节肽的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：

第一步、将羊乳清蛋白加水溶解后，调节pH值至1.5-4.0，加入胃蛋白酶进行水解反应，得到水解反应体系；

第二步、保持水解反应体系的温度不变，调整水解反应体系的pH值至6.0-8.0，加入胰蛋白酶，继续水解1-2h；升高温度继续水解得到羊乳蛋白水解液；

第三步、将羊乳蛋白水解液冷却后离心取上清，收集滤过液，冻干，得到羊乳蛋白水解物粉末；

第四步、采用凝胶色谱柱和高效液相色谱对羊乳蛋白水解物进行分离纯化，得到羊乳蛋白免疫调节肽；

其中：胃蛋白酶按照每150g羊乳清蛋白添加500KU蛋白酶的比例加入；胰蛋白酶按照每150g羊乳蛋白添加400KU蛋白酶的比例加入。

5.根据权利要求3或4所述的羊乳清蛋白免疫调节肽的制备方法，其特征在于：所述第一步中：

所述羊乳清蛋白的质量与水的体积的配比为1：10-1：30；

水解反应的温度为30℃-60℃，水解反应的时间为1-2小时；

调节pH值采用酸液，所述酸液为食品级乳酸以及柠檬酸溶液中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的羊乳清蛋白免疫调节肽的制备方法，其特征在于：所述第二步中：升高温度至80℃-90℃，在80℃-90℃条件下保温10-30min；

调节pH值采用碱液，所述碱液为食品级碳酸钠以及碳酸氢钠溶液中的至少一种。

7.根据权利要求6所述的羊乳清蛋白免疫调节肽的制备方法，其特征在于：所述第三步中：通过超滤膜收集滤液，所述超滤膜采用截留分子量为3000-10000Da的超滤膜。

8.根据权利要求7所述的羊乳清蛋白免疫调节肽的制备方法，其特征在于：所述第四步中采用凝胶色谱柱和高效液相色谱对羊乳蛋白水解物进行分离纯化具体包括以下步骤：

步骤4.1、采用凝胶色谱对羊乳蛋白水解物进行浓缩得到精制羊乳蛋白免疫调节肽，其中：所述凝胶色谱柱为SephadexG-25，流动相为超纯水，流速为0.7-1.0mL/min，进样量为10-30mg，收集左数第二个峰后进行浓缩得到精制羊乳蛋白免疫调节肽；

步骤4.2、采用高效液相色谱仪对精制羊乳蛋白免疫调节肽进行纯化，收集其中的三个主峰，冷冻干燥即得羊乳蛋白免疫调节肽。

9.一种如权利要求1-2任意一项所述的羊乳清蛋白免疫调节肽的应用，其特征在于：用于制备具有免疫调节活性的食品或保健食品。