[发明专利]一种组蛋白提取试剂盒及其提取方法在审
| 申请号： | 201810063811.4 | 申请日： | 2018-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN110066311A | 公开（公告）日： | 2019-07-30 |
| 发明（设计）人： | 王蕊;方祺;李子刚 | 申请（专利权）人： | 深圳市泰锐生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C07K1/30 |
| 代理公司： | 深圳市六加知识产权代理有限公司 44372 | 代理人： | 罗水江 |
| 地址： | 518000 广东省深圳市龙华新*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 组蛋白 提取试剂盒 细胞裂解液 试剂盒 亚型 生物技术领域 生物学功能 蛋白翻译 理想实验 裂解条件 提取分离 沉淀液 检测组 去污剂 修饰 蛋白质 细胞 研究 | ||
1.一种组蛋白提取试剂盒，其特征在于，包括：细胞裂解液、去污剂、0.4M H2SO4溶液以及组蛋白沉淀液；
所述细胞裂解液由如下组分组成：
10mM TrisCl，pH值为8.0；
150mM NaCl；
1.5mM MgCl2；
1mM PMSF。
2.根据权利要求1所述的组蛋白提取试剂盒，其特征在于，所述去污剂为：0.5％的NP-40。
3.根据权利要求1所述的组蛋白提取试剂盒，其特征在于，所述去污剂为0.1％的NP-40和0.1％的Tween20的混合液。
4.根据权利要求1所述的组蛋白提取试剂盒，其特征在于，所述组蛋白沉淀液为三氯乙酸。
5.根据权利要求1所述的组蛋白提取试剂盒，其特征在于，所述组蛋白沉淀液为5.4％高氯酸。
6.根据权利要求1或2所述的组蛋白提取试剂盒，其特征在于，还包括用于洗涤沉淀的冰丙酮。
7.一种应用如权利要求1-6任一所述的组蛋白提取试剂盒的组蛋白提取方法，其特征在于，包括：
使用所述细胞裂解液和所述去污剂重悬细胞，进行细胞裂解并获得细胞核沉淀；
向所述细胞核沉淀加入所述0.4M H2SO4溶液进行重悬；
对所述重悬后的细胞核沉淀进行离心，分离获得上清；
向所述上清滴加所述组蛋白沉淀液；
对所述滴加了所述组蛋白沉淀液的上清进行离心，分离获得组蛋白沉淀。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法还包括：使用冰丙醇温和洗涤所述组蛋白沉淀两次。
9.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述向所述细胞核沉淀加入所述0.4MH2SO4溶液进行重悬，具体包括：
将所述细胞核沉淀溶解于所述0.4M H2SO4溶液中，混悬在冰上反应30-60分钟，或者在4℃下过夜放置；
所述细胞核沉淀与所述0.4M H2SO4溶液的比例为每2x107个细胞/ml。
10.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述向所述上清滴加所述组蛋白沉淀液，具体包括：
向所述上清逐滴滴加三氯乙酸直至终浓度为20％。
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