[发明专利]一种特异性检测血清中真菌的试剂及其制备方法在审
| 申请号： | 201810062735.5 | 申请日： | 2018-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN108387739A | 公开（公告）日： | 2018-08-10 |
| 发明（设计）人： | 丁友玲;陈晓佳;李红玲 | 申请（专利权）人： | 福州启新生物技术有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68;G01N33/579;G01N33/569 |
| 代理公司： | 福州市景弘专利代理事务所(普通合伙) 35219 | 代理人： | 林祥翔;黄以琳 |
| 地址： | 350100 福建省福州市福州高新区*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 多粘菌素 鲎试剂 血清 细菌内毒素 种特异性 真菌 失活 检测 革兰氏阴性菌 假阳性结果 磷脂 交叉反应 游离氨基 真菌检测 磷酸根 脂多糖 酯多糖 制备 | ||
1.一种特异性检测血清中真菌的试剂，其特征在于，所述试剂的组分包括多粘菌素和鲎试剂。
2.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述多粘菌素的添加量为4.0mg/ml鲎试剂。
3.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述多粘菌素为多粘菌素E。
4.根据权利要求1所述的试剂，其特征在于，所述试剂的组分还包括表面活性剂，所述表面活性剂为Triton400。
5.一种特异性检测血清中真菌的试剂制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
将多粘菌素、表面活性剂加入鲎试剂混合均匀，调节试剂pH值为5.5-6.5；所述多粘菌素的添加量为4.0mg/ml鲎试剂，所述表面活性剂的添加量为0.1％。
6.根据权利要求5所述的试剂制备方法，其特征在于，所述鲎试剂的制备过程包括以下步骤：
细胞剪切：将鲎血细胞剪切后加入7-9倍的质量细胞崩解液，使细胞充分吸水膨胀后-10℃以下进行保存；
细胞冻融：将细胞用冰水浴解冻后-10℃以下进行冻结，重复以上步骤5-8次；
细胞液提取：将反复冻融后解冻的细胞离心提取上层细胞液；细胞液-10℃以下进行冻结；
氯仿精制：将细胞液加入1.5-3倍质量的氯仿后，-10℃以下冻结混合物；将混合物置于冰水浴中解冻，解冻后离心提取的上清液即为鲎试剂。
7.根据权利要求5所述的试剂制备方法，其特征在于，所述多粘菌素为多粘菌素E，所述表面活性剂为Triton400。
8.根据权利要求5所述的试剂制备方法，其特征在于，所述制备过程在4℃以下进行。
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