[发明专利]克柔念珠菌STR分子标记及其应用有效
申请号: | 201810060340.1 | 申请日: | 2018-01-22 |
公开(公告)号: | CN108103229B | 公开(公告)日: | 2021-09-07 |
发明(设计)人: | 肖盟;单小云;龚杰;范欣;徐英春;张建中;何利华;王贺 | 申请(专利权)人: | 中国医学科学院北京协和医院 |
主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
代理公司: | 北京驰纳智财知识产权代理事务所(普通合伙) 11367 | 代理人: | 单晶 |
地址: | 100730 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 念珠菌 str 分子 标记 及其 应用 | ||
1.一种克柔念珠菌STR分子标记或STR分子标记组合的检测方法,其特征在于,所述STR分子标记为SEQ ID NO:1-40所示序列中的任一个,所述STR分子标记组合为SEQ ID NO:1-40所示序列中的任意两个或多个组合,
包括以下步骤:
(1)提取克柔念珠菌的基因组DNA;
(2)合成SEQ ID NO:41-120所示的引物,并使用荧光染料对正向引物5'端进行标记,获得荧光标记的引物组;
(3)以步骤(1)提取的基因组DNA为模板,利用步骤(2)荧光标记的引物组进行PCR扩增;
(4)对扩增产物中的单色荧光标记DNA片段进行多态性检测。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)采用的PCR反应体系为:2×PremixTaq 10ul,10uM正、反向引物各1ul,纯水7ul,DNA模板1ul;
PCR程序为:95℃ 5min;95℃ 30sec,56-62℃ 30sec,72℃ 40sec,33个循环;72℃5min。
3.非诊断目的克柔念珠菌检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)提取待测样品DNA;
(2)以步骤(1)提取的DNA为模板,利用SEQ ID NO:41-120所示的引物进行PCR扩增;
(3)分析PCR扩增产物。
4. 根据权利要求1或2所述STR分子标记或分子标记组合的检测方法在克柔念珠菌的分子分型、分子溯源、 群体遗传学和系统进化分析中的应用。
5.用于执行权利要求1或2中克柔念珠菌STR分子标记或STR分子标记组合的检测方法的试剂盒。
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