[发明专利]ABCB1、CYP3A5基因检测引物组、试剂盒及检测方法在审
申请号: | 201810059600.3 | 申请日: | 2018-01-22 |
公开(公告)号: | CN109439738A | 公开(公告)日: | 2019-03-08 |
发明(设计)人: | 盛司潼;徐云;符兆威 | 申请(专利权)人: | 武汉康昕瑞基因健康科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6869 | 分类号: | C12Q1/6869;C12N15/11 |
代理公司: | 北京远智汇知识产权代理有限公司 11659 | 代理人: | 张海英 |
地址: | 430040 湖北省武汉市东湖新技术*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 测位 引物组 检测 特异性扩增 核酸片段 检测引物 位点 分子生物学领域 基因检测试剂盒 基因测序技术 基因工程 基因检测 假阳性率 突变检测 高通量 基因型 灵敏度 试剂盒 通量 引物 | ||
1.一种ABCB1、CYP3A5基因检测引物组,用于对含待测位点的核酸片段进行特异性扩增,其特征在于,所述待测位点包括ABCB1基因上的rs1045642位点和CYP3A5基因上的rs776746位点,所述引物组包括rs1045642引物组、rs776746引物;
所述rs1045642引物组包括rs1045642外引物组和rs1045642内引物组,所述rs1045642外引物组包括rs1045642外上游引物SEQ ID NO:1以及rs1045642外下游引物SEQ ID NO:3;所述rs1045642内引物组包括rs1045642内上游引物SEQ ID NO:2以及rs1045642内下游引物SEQ ID NO:4;
所述rs776746引物组包括rs776746外引物组和rs776746内引物组,所述rs776746外引物组包括rs776746外上游引物SEQ ID NO:5以及rs776746外下游引物SEQ ID NO:7;所述rs776746内引物组包括rs776746内上游引物SEQ ID NO:6以及rs776746内下游引物SEQ IDNO:8。
2.一种ABCB1、CYP3A5基因检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的ABCB1、CYP3A5基因检测引物组。
3.根据权利要求2所述的基因检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括接头,所述接头上含有标签序列,所述接头用于直接与含rs1045642位点和rs776746位点的扩增产物连接。
4.根据权利要求2所述的基因检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括荧光标记的寡聚核苷酸探针和无荧光标记的寡聚核苷酸探针。
5.根据权利要求2所述的基因检测试剂盒,其特征在于,所述试剂盒还包括测序引物,所述测序引物包括对含rs1045642位点的文库分子进行测序的rs1045642测序引物SEQ IDNO:9、对含rs776746位点的文库分子进行测序的rs776746测序引物SEQ ID NO:10。
6.一种ABCB1、CYP3A5基因检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
A、利用引物组,分别对含rs1045642位点和rs776746位点的样本进行扩增,得扩增产物;所述引物组包括rs1045642引物组、rs776746引物;
所述rs1045642引物组包括rs1045642外引物组和rs1045642内引物组,所述rs1045642外引物组包括rs1045642外上游引物SEQ ID NO:1以及rs1045642外下游引物SEQ ID NO:3;所述rs1045642内引物组包括rs1045642内上游引物SEQ ID NO:2以及rs1045642内下游引物SEQ ID NO:4;
所述rs776746引物组包括rs776746外引物组和rs776746内引物组,所述rs776746外引物组包括rs776746外上游引物SEQ ID NO:5以及rs776746外下游引物SEQ ID NO:7;所述rs776746内引物组包括rs776746内上游引物SEQ ID NO:6以及rs776746内下游引物SEQ IDNO:8;
B、在所述扩增产物上连接接头,得到文库分子;
C、采用第二代高通量基因测序技术对所述文库分子进行测序,确定待测位点的基因型。
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