[发明专利]一种选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法

说明书

本发明公开了一种选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法，包括菌源和接种体的制备、PDA培养基的制备、牙签附加麦粒的接种体制备和接种，与现有技术相比，本发明是利用秦巴地区特有的花期气候条件，通过牙签附加麦粒接菌，进行抗病种质资源方法的集成创新，对种植资源进行抗病性鉴定、改良和选育，具有推广应用的价值。通过本发明的方法，对油菜育种的材料进行了更加准确的抗性鉴定和分级，有目的的进行种质资源的抗性改良和资源配组；通过该种方法的使用，创制出了1003‑2AB、312A、汉3A、SY13A等4个优质抗病不育系，并通过省级鉴定，培育出了汉油8号、汉油1618等一批优质抗病品种通过国家审定和省级审定；培育出了汉油1418、汉油1428、汉11C29、汉油7号、汉油10号等一批待登记的品种。

技术领域

本发明涉及植物育种技术领域，尤其涉及一种选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法。

背景技术

作物育种又称品种改良。高产、稳产、优质、高效是育种的目标。但特定的育种目标要综合考虑当地品种的现状、育种基础、自然环境、耕作制度、栽培水平、经济条件等因素，并随生产的发展不断加以调整。还要以本地区种植面积较大或有代表性的几个品种作为标准，明确需要保持或提高、改进或克服的方向，使育种目标具体化。种植高产抗病的优良品种，是获得油菜既经济，有效又安全的措施。目前，在油菜及其近缘种中还没有发现完全抗或免疫的种质资源，油菜品种间只有耐病性不同。由于油菜菌核病抗性表现为数量性状，易受环境影响，加之尚无准确可靠的病害鉴定方法，所以难以选择到真正的抗病植株。因此，生产上推广的油菜品种的抗病性大部分都为中感到低感，抗病品种少之又少，另外抗病性的好坏直接影响了油菜的产量和品质。因此，在当前油菜生产发展中，选用一种合适的抗病种质资源的创制方法至关重要。

发明内容

本发明的目的就在于为了解决上述问题而提供一种选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法。

本发明通过以下技术方案来实现上述目的：

本发明包括以下步骤：

(1)菌源和接种体的制备：菌源：受侵染的油菜茎中收集的菌核，经表面消毒后，接种于PDA培养基上，在23℃培养4～6天至长出菌丝进行纯化鉴定后，置于4℃冰箱保存备用；

(2)PDA培养基的制备：马铃薯洗净去皮，再称取200g切成小块，加水煮沸20～30min，能被玻璃棒戳破即可，用纱布过滤，加热，加10g琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入葡萄糖，搅拌均匀，稍冷却后再补足水分至1000mL，分装后，121℃灭菌20min左右后，冷却后贮存备用；

(3)牙签附加麦粒的接种体制备：麦粒在水中浸泡72h，中间换水3次，选择粗细均匀的牙签，在PDA中煮沸10min后与麦粒一起分装，灭菌后，分装瓶内放直径为1cm左右的菌丝块，于21℃，黑暗培养7天；

(4)接种。

所述步骤(4)中接种的重点材料的接种方法为：油菜初花期时进行菌核病人工牙签茎秆菌丝体接种和麦粒根部接种，保证充分发病；牙签接种是在茎秆离地面25-30cm处用铁钉刺孔后，将带有菌丝体的牙签直接插入茎秆内，接菌后早晚喷水各一次，连续一周。

所述步骤(4)中接种的种质资源圃所有套袋材料的接种方法为：根据汉中特有的气候条件，花期选择连阴雨天，将麦粒撒于植株根部进行接菌。

所述步骤(4)中接种的材料的抗性鉴定、选育与分析：成熟期根据周必文的抗性分级方法和国家油菜菌核病抗性分级标准，分别对相应的牙签附加麦粒接菌的重点材料和麦粒接菌的整个种植资源圃材料进行抗性鉴定和分级，同时淘汰发病严重的株系，保留未发病株系隔年进行材料的创制与抗性改良。

本发明的有益效果在于：