[发明专利]一种选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法

权利要求书

1.一种选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)菌源和接种体的制备：菌源：受侵染的油菜茎中收集的菌核，经表面消毒后，接种于PDA培养基上，在23℃培养4～6天至长出菌丝进行纯化鉴定后，置于4℃冰箱保存备用；

(2)PDA培养基的制备：马铃薯洗净去皮，再称取200g切成小块，加水煮沸20～30min，能被玻璃棒戳破即可，用纱布过滤，加热，加10g琼脂，继续加热搅拌混匀，待琼脂溶解完后，加入葡萄糖，搅拌均匀，稍冷却后再补足水分至1000mL，分装后，121℃灭菌20min左右后，冷却后贮存备用；

(3)牙签附加麦粒的接种体制备：麦粒在水中浸泡72h，中间换水3次，选择粗细均匀的牙签，在PDA中煮沸10min后与麦粒一起分装，灭菌后，分装瓶内放直径为1cm左右的菌丝块，于21℃，黑暗培养7天；

(4)接种。

2.根据权利要求1所述的选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法，其特征在于：所述步骤(4)中接种的重点材料的接种方法为：油菜初花期时进行菌核病人工牙签茎秆菌丝体接种和麦粒根部接种，保证充分发病；牙签接种是在茎秆离地面25-30cm处，将带有菌丝体的牙签直接插入茎秆内，接菌后早晚喷水各一次，连续一周。

3.根据权利要求1所述的选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法，其特征在于：所述步骤(4)中接种的种质资源圃所有套袋材料的接种方法为：根据秦巴地区特有的气候条件，花期选择连阴雨天，将麦粒撒于植株根部进行接菌。

4.根据权利要求1所述的选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法，其特征在于：所述步骤(4)中接种的材料的抗性鉴定、选育与分析：成熟期根据周必文的抗性分级方法和国家油菜菌核病抗性分级标准，分别对相应的牙签附加麦粒接菌的重点材料和麦粒接菌的整个种植资源圃材料进行抗性鉴定和分级。

5.根据权利要求1所述的选育抗菌核病甘蓝型油菜育种材料的方法，其特征在于：本发明是利用秦巴地区特有的花期气候条件，通过牙签附加麦粒接菌，进行抗病种质资源方法的集成创新，对种植资源进行抗病性鉴定、改良和选育，成效显著，推广应用价值广泛。