[发明专利]一种参桂益心颗粒质量标准的检测方法

权利要求书

1.一种参桂益心颗粒的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下内容：

（1）人参的薄层色谱鉴别；

（2）水蛭的薄层色谱鉴别；

（3）桂枝的薄层色谱鉴别；

（4）参桂益心颗粒的含量测定；

所述人参的薄层色谱鉴别步骤如下：

（1）供试品溶液的制备：取样品10g，置具塞锥形瓶中，加甲醇100mL，超声处理1.5小时，摇匀，滤过，精密吸取续滤液50mL，蒸干，残液以20mL水分次转移至分液漏斗中，加醋酸乙酯提取3次，每次30mL，弃去醋酸乙酯提取液，水液用水饱和正丁醇提取5次，每次30mL，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次30mL，弃去氨液，正丁醇液蒸干；残渣加水2mL使溶解，通过D101型大孔吸附树脂柱，以80mL水洗脱，弃去水液，再用20%乙醇40mL洗脱，弃去20%乙醇洗脱液，再用70%乙醇100mL洗脱，收集洗脱液，蒸干；残渣加甲醇溶解并转移至5mL容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，滤过即得；

（2）阴性对照溶液的制备：取缺人参的阴性颗粒10g，同供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液；

（3）对照药材溶液的制备：取人参对照药材1g，同供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液；

（4）对照品溶液的制备：取人参皂苷Re、Rb₁、Rg₁适量，分别加甲醇制成2mg/mL的对照品溶液；

（5）鉴别：吸取供试品溶液、阴性对照溶液、对照药材溶液各8μL，对照品溶液各6μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以1:1:2的正丁醇-乙酸乙酯-水上层溶液为展开剂，以10％硫酸乙醇溶液为显色剂，105℃加热至斑点显色清晰，365nm下检视。

2.根据权利要求1所述参桂益心颗粒的检测方法，其特征在于，所述水蛭的薄层色谱鉴别步骤如下：

（1）供试品溶液的制备：取样品10g，加乙醇30mL，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，加无水乙醇2mL使溶解，即得；

（2）阴性对照溶液的制备：取缺水蛭的阴性颗粒10g，同供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液；

（3）对照药材溶液的制备：取水蛭对照药材0.5g，同供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液；

（4）鉴别：分别吸取供试品溶液、阴性对照溶液、对照药材溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃烘至斑点显色清晰，365nm下检视。

3.根据权利要求1所述参桂益心颗粒的检测方法，其特征在于，所述桂枝的薄层色谱鉴别步骤如下：

（1）供试品溶液的制备：取样品5g，加乙酸乙酯30mL，超声处理30分钟，滤过，滤液浓缩至0.5mL，即得；

（2）阴性对照溶液的制备：取缺桂枝的阴性颗粒5g，同供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液；

（3）对照药材溶液的制备：取桂枝药材0.5g，同供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液；

（4）鉴别：分别吸取供试品溶液、阴性对照溶液、对照药材溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙醚-冰醋酸为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm下检视。

4.根据权利要求1所述参桂益心颗粒的检测方法，其特征在于，所述参桂益心颗粒的含量测定内容如下：

（1）色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以水为流动相B；进行梯度洗脱50分钟；检测波长为203nm；流速1mL/min；理论塔板数按人参皂苷Rb₁计算应不低于3000；

（2）测定步骤如下：

1）对照品溶液的制备：取人参皂苷Rb₁对照品5.07mg，精密称定，置25mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，制成每1mL中含0.2028mg的溶液，即得；

2）供试品溶液的制备：取样品适量，研细，取2.0g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入甲醇50mL，称重，回流处理30分钟，放冷，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密取续滤液25mL置圆底烧瓶，旋转蒸干，残渣加甲醇溶解，定容至5mL，以15000转/分钟离心10分钟即得；

3）阴性对照溶液的制备：取缺人参的阴性颗粒，按供试品溶液的制备方法制成阴性对照溶液；

4）测定：分别吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10μL进样，在含量测定内容（1）的色谱条件下进行测定；

5）进行方法学考察：进行线性范围的考察、精密度试验、稳定性试验、重复性试验和回收率试验。