[发明专利]线粒体基因检测试剂盒及使用方法在审
| 申请号： | 201810051459.2 | 申请日： | 2018-01-19 |
| 公开（公告）号： | CN108315399A | 公开（公告）日： | 2018-07-24 |
| 发明（设计）人： | 袁妍娇;刘洪伟;张桦林;万华靖;亓宇;廖勇;吴峰 | 申请（专利权）人： | 成都新基因格生物科技有限公司;四川基因格司法鉴定所 |
| 主分类号： | C12Q1/686 | 分类号： | C12Q1/686;C12Q1/6869;C12Q1/6888 |
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| 地址： | 610041 四川省成*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 线粒体基因 检测试剂 亲缘关系鉴定 法医学 个体识别 灵敏度 两组 引物 检测 应用 | ||
1.一种线粒体基因检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括两组引物对、用于PCR扩增的试剂，以及用于sanger测序的试剂；所述的两组引物对为：
第一组引物对：核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示的上游引物及核苷酸序列如SEQ IDNO：2所示的下游引物；第二组引物对：核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示的上游引物及核苷酸序列如SEQ ID NO：4所示的下游引物。
2.根据权利要求1所述的线粒体基因检测试剂盒，其特征在于，所述的用于PCR扩增的试剂包括：DNA聚合酶、dNTP和PCR反应缓冲液。
3.根据权利要求1所述的线粒体基因检测试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括用于DNA提取的试剂。
4.一种权利要求1-2任一项所述的线粒体基因检测试剂盒的使用方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、PCR扩增，获得包括线粒体控制区信息的两组基因片段：以人总DNA为模板，所述第一组引物对为引物，经过PCR扩增后获得第一组基因片段；以人总DNA为模板，所述第二组引物对为引物，经过PCR扩增后获得第二组基因片段；
S2、对S1中所述的两组基因片段分别进行sanger双向测序，得到两组测序数据结果；
S3、比对结果：将S2中的两组测序数据结果分别与Anderson标准序列比对，获得基因特征点。
5.根据权利要求3所述的线粒体基因检测试剂盒的使用方法，其特征在于，步骤S2 中，所述 PCR 扩增的反应参数为 ：预变性 95℃，5min ；变性 95℃，45s ；退火 55℃，45s ；延伸 72℃，1min；终延伸 72℃，5min ；循环数 35-45。
6.权利要求1所述的线粒体基因检测试剂盒在法医个体识别产品中的应用。
7.权利要求1所述的线粒体基因检测试剂盒在法医母系亲缘关系鉴定产品中的应用。
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