[发明专利]一种新型的细胞免疫增强佐剂

说明书

本发明涉及生物制品领域，特别是用于治疗性疫苗的一种新型的细胞免疫增强佐剂。新型的细胞免疫增强佐剂含有人参皂苷Rb1、海藻糖、无水乙醇、吐温20、氨基酸、具有酸碱度缓冲能力的缓冲物；经配制，混匀，调节溶液酸碱度，加水定容，再滤器过滤除菌。该细胞免疫增强佐剂能有效提高治疗性疫苗的特异性细胞免疫效果，工艺简单，便于制备和除菌，在2‑8度稳定保存，有利于常规冷链运输,是一种安全、稳定、有效的，适用于大规模工业化生产的治疗性疫苗佐剂。

技术领域

本发明涉及生物制品领域，特别是一种用于治疗性疫苗的新型细胞免疫增强佐剂。

背景技术

治疗性疫苗是指在已感染病原生物或患某些疾病的机体中，通过诱导机体产生特异性的或非特异性的免疫应答，以达到治疗或防止疾病恶化的生物制品。治疗性疫苗所用的免疫原一般选用能引起中和抗体及可诱生杀伤性T细胞（CTL）免疫应答的抗原。但是，单独的抗原往往无法诱导机体获得有效的免疫应答水平，从而使得疫苗的治疗效果大打折扣。因此，选择一种有效、安全的疫苗佐剂来增强治疗性疫苗的免疫应答水平，具有重要的意义。临床上已广泛应用的疫苗佐剂有氢氧化铝、MF59、AS40等，这些佐剂主要用于提高预防性疫苗的体液免疫效果。目前，CpG佐剂是一种有效增强机体细胞免疫的佐剂，但是因其安全性还存在一定的争议，故而使得其上市的时间悬而未决。因此，有必要寻找一种安全、有效、新型的佐剂来增强治疗性疫苗的细胞免疫效果。

人参皂苷作为人参的主要有效成分之一是一类固醇类化合物，目前已有40多种人参皂苷单体被分离得到。现有研究表明，很多人参皂苷单体都具有调节免疫协同的功能。例如人参皂苷Rg1在体内外试验中均能选择性的增强老年大鼠脾淋巴细胞增殖能力和白介素-2的产生及释放；人参皂苷Rh1能够直接促进脾淋巴细胞增殖，明显提高小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬能力，促进NO的释放；人参皂苷Ro能显著促进小鼠脾淋巴细胞的增殖，促进ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞白介素-2和干扰素-γ的产生。这些研究结果揭示了人参皂苷在机体的免疫应答中可以起到关键的调节作用。但是，人参皂苷单体也存在一些问题。一些人参皂苷不溶于水，只溶于有机溶剂，应该使得其临床应用的机会渺茫；同时，一些人参皂苷溶解后稳定性不佳，大大限制了其使用范围。因此，选择一种合适的人参皂苷单体，通过合理的配制，使得其能作为安全、稳定、有效的治疗性疫苗佐剂，具有重大社会效益和经济效益。

发明内容

本发明的目的是提供一种新型的细胞免疫增强佐剂，该佐剂可以作为治疗性疫苗增强佐剂，用于提高治疗性疫苗的免疫效果，且安全、稳定，适用于大规模的工业化生产。

本发明新型的细胞免疫增强佐剂含有人参皂苷Rb1、海藻糖、无水乙醇、吐温20、氨基酸、具有酸碱度缓冲能力的缓冲物；经配制，混匀，调节溶液酸碱度，加水定容，再滤器过滤除菌。该细胞免疫增强佐剂能有效提高治疗性疫苗的特异性细胞免疫效果，工艺简单，便于制备和除菌，在2-8度稳定保存，有利于常规冷链运输,是一种安全、稳定、有效的，适用于大规模工业化生产的治疗性疫苗佐剂。

本发明新型的细胞免疫增强佐剂，该疫苗佐剂含有人参皂苷Rb1、海藻糖、具有酸碱度缓冲能力的缓冲物、无水乙醇、吐温20、氨基酸；具体配方组份为人参皂苷含量Rb1含量为0.4-0.8克/升，海藻糖含量为40-80克/升，具有酸碱度缓冲能力的缓冲液浓度为5-40毫摩尔/升，无水乙醇5毫升/升，吐温20含量为4-8克/升，氨基酸含量为5-10克/升；具体配制方法如下：

依次取具有酸碱度缓冲能力的缓冲液、海藻糖、无水乙醇、氨基酸、吐温20溶于水中，再加入事先溶于水的人参皂苷Rb1，混匀后调节溶液酸碱度至6.5-8.5，加水定容，然后用0.22微米滤器过滤除菌，即得。

本发明新型的细胞免疫增强佐剂中的具有酸碱度缓冲能力的缓冲物，包括，但不局限于，磷酸盐缓冲物、三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲物、枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲物、氨-氯化铵缓冲物、醋酸-醋酸钠缓冲物。

本发明新型的细胞免疫增强佐剂中的氨基酸包括但不局限于L-半胱氨酸。