[发明专利]用液相色谱法同时分离测定复方氨基酸注射液18AA中焦谷氨酸和蛋氨酸亚砜杂质的方法

说明书

本发明公开了一种用液相色谱法同时分离测定复方氨基酸注射液18AA中焦谷氨酸和蛋氨酸亚砜杂质的方法，所述方法是先将供试品溶液在高效液相色谱仪中测定，再按照标准曲线法以峰面积计算供试品中焦谷氨酸和蛋氨酸亚砜杂质的含量。本发明的检测方法简便可行，分析时间短，专属性强，重现性好，可以有效测定复方氨基酸注射液18AA中的焦谷氨酸和蛋氨酸亚砜杂质。

技术领域

本发明涉及药物质量测定方法技术领域，尤其涉及一种用高效液相色谱仪同时分离检测复方氨基酸注射液18AA中谷氨酸降解杂质焦谷氨酸与甲硫氨酸降解杂质蛋氨酸亚砜的方法。

背景技术

复方氨基酸注射液18AA主要用于蛋白质摄入不足、吸收障碍等氨基酸不能满足机体代谢需要的患者，亦用于改善手术后病人的营养状况。复方氨基酸注射液18AA的飞速发展使得临床危重症患者得到良好的肠外营养支持，保证了机体的正氮平衡，促进了蛋白质的合成。随着公众和媒体对药品安全性的日益关注，药品中的杂质已成为药品质量控制中的重要指标。近年来，随着新的分析检测技术的问世和推广，药物中微量的有害物质正逐渐被阐明揭示其化学结构或物质基础，在杂质的安全性研究上也涌现了一些快速筛选平台，为今后产品的质量控制奠定了基础。将杂质水平与药物安全性的关联性研究透彻，这也是今后研究的方向之一。

由于缺乏发色团，氨基酸的纯度评估工作一直是个难题。在过去的欧洲药典中，氨基酸原料的杂质监控通常借助于茚三酮试剂显色的薄层色谱法，然而该方法的灵敏度和性能较差。在新版欧洲药典中氨基酸的杂质检验变更为离子交换柱后茚三酮衍生反应的分析方法(EDQM,European Pharmacopoeia 8th Edition,2015)。

焦谷氨酸(PGA)是谷氨酸在高温下脱水缩合而成的降解产物，具有一定的对谷氨酸等受体的阻断作用，也可能引起神经毒性和代谢异常。蛋氨酸亚砜(MSO)是甲硫氨酸的氧化杂质，对男性肝细胞具有一定的毒性损伤作用。

焦谷氨酸和蛋氨酸亚砜两个杂质的存在对复方氨基酸注射液18AA的临床用药安全构成了潜在的威胁。然而，通过文献检索，针对复方氨基酸药物制剂中的氨基酸降解杂质的研究却鲜有报道。仅有谢升谷等人报道了研究复方氨基酸注射液18AA中的降解杂质焦谷氨酸(药物分析杂志,2015,35(4),705-709)，但该方法并不能应用于同时分离检测焦谷氨酸和蛋氨酸亚砜。同时分离检测复方氨基酸注射液18AA中的焦谷氨酸和蛋氨酸亚砜杂质的检测方法并未见相关报道。

因此，需要一种科学、有效的同时分离测定复方氨基酸注射液18AA中焦谷氨酸和蛋氨酸亚砜杂质的方法，既可以降低检测成本、减轻劳动强度又节能环保。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用液相色谱法同时分离测定复方氨基酸注射液18AA中焦谷氨酸和蛋氨酸亚砜杂质的方法。

为实现上述目的，本发明采用以下内容：

一种用液相色谱法同时分离测定复方氨基酸注射液18AA中焦谷氨酸和蛋氨酸亚砜杂质的方法，所述方法是先将供试品溶液在高效液相色谱仪中测定，再按照标准曲线法以峰面积计算供试品中焦谷氨酸和蛋氨酸亚砜杂质的含量；

色谱条件为：

色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱；

流动相A为0.01mol·L^-1磷酸氢二铵溶液，其中含0.015mol·L^-1庚烷磺酸钠缓冲溶液，用磷酸调节pH值至2.3±0.05；

流动相B为乙腈；

流动相洗脱程序：