[发明专利]一种单细胞激光弹射基片、方法及应用有效
| 申请号: | 201810041167.0 | 申请日: | 2018-01-16 |
| 公开(公告)号: | CN110042053B | 公开(公告)日: | 2022-07-01 |
| 发明(设计)人: | 勾洪磊;荆晓艳;籍月彤;徐健 | 申请(专利权)人: | 中国科学院青岛生物能源与过程研究所 |
| 主分类号: | C12M1/42 | 分类号: | C12M1/42;C12M1/00;C12N1/02;C12N1/16;C12N5/09 |
| 代理公司: | 上海一平知识产权代理有限公司 31266 | 代理人: | 王正君;徐迅 |
| 地址: | 266101 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 单细胞 激光 弹射 方法 应用 | ||
1.一种单细胞激光弹射基片,其特征在于:依次包含基底层和镀膜层,其中镀膜层上偶联有氨基基团或特异性抗体,所述氨基基团或特异性抗体用于结合单细胞;所述特异性抗体包括单克隆抗体或多克隆抗体,所述单细胞为细胞膜完整且活性不丧失的人或动物来源的细胞,所述氨基基团或特异性抗体通过共价反应与镀膜层偶联。
2.根据权利要求1所述的单细胞激光弹射基片,其特征在于:所述基底层材料选自硅酸盐玻璃、石英玻璃和氟化钙玻璃中的一种或多种,所述镀膜层材料选自ITO(氧化铟锡)、FTO(氟掺杂氧化锡)、AZO(铝掺杂氧化锌)中的一种或多种。
3.一种液相单细胞弹射方法,其特征在于:包括以下步骤:
1) 将细胞悬液滴涂于权利要求1所述的单细胞激光弹射基片镀膜层表面并孵育;
2) 冲洗除去未被结合的细胞,并使细胞始终处于液相环境中;
3) 利用显微镜观察识别结合于单细胞激光弹射基片上的细胞,采用脉冲激光进行单细胞弹射使单细胞脱离单细胞激光弹射基片表面;
4) 使用接收装置接收被分离的单细胞。
4.根据权利要求3所述的液相单细胞弹射方法,其特征在于:所述液相环境为中性等渗溶液。
5.根据权利要求3所述的液相单细胞弹射方法,其特征在于:所述孵育的时间为10-30分钟。
6.根据权利要求3所述的液相单细胞弹射方法,其特征在于:所述观察识别包括收集单细胞拉曼散射信号或荧光信号,获得单细胞拉曼图谱或荧光图像,分析拉曼图谱或荧光图像识别单细胞。
7.一种单细胞激光弹射基片在循环肿瘤细胞(CTC)分析中的应用,所述应用不涉及疾病的诊断和治疗,其特征在于:包括以下步骤:
1)CTC细胞悬液滴涂于权利要求1所述的单细胞激光弹射基片表面;
2)利用拉曼检测或荧光成像对CTC细胞进行观察识别,并采用激光弹射技术分离获取单个CTC细胞;
3)对分离后的单个CTC细胞进行单细胞转录组或基因组测序,分析其表达谱或基因突变位点。
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