[发明专利]粘红酵母的活菌生物胶囊在体内传递胰岛素的应用在审
| 申请号： | 201810039779.6 | 申请日： | 2018-01-16 |
| 公开（公告）号： | CN110042118A | 公开（公告）日： | 2019-07-23 |
| 发明（设计）人： | 孙晗笑;汪佳佳;利时雨 | 申请（专利权）人： | 广州溯原生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/81 | 分类号： | C12N15/81;C12N15/66;A61K38/28;A61P3/10;A61P3/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 510000 广东省广州市广州*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 粘红酵母 生物胶囊 重组菌株 胰岛素 多肽 构建 活菌 菌株 外源 小鼠 体内 转入 外源性胰岛素 整合表达载体 电穿孔技术 糖尿病小鼠 同源重组法 转移酶基因 卵磷脂 动物模型 含量增加 外源多肽 小鼠血清 野生菌株 重要器官 高表达 降血糖 传递 磷酸 胆碱 脂滴 肝脏 应用 验证 发现 成功 携带 基因 | ||
【权利要求书】：
1.一种粘红酵母的活菌生物胶囊在体内传递胰岛素的应用，其特征在于，磷酸胞苷胆碱转移酶基因CCT整合表达载体，将磷酸胞苷胆碱转移酶整合到酵母菌的基因组。
2.根据权利要求1所述的磷酸胞苷胆碱转移酶基因整合表达载体，其特征在于,所述产油脂酵母菌是粘红酵母。
3. 根据权利要求1所述的磷酸胞苷胆碱转移酶基因整合表达载体的构建方法, 其特征在于，其包括的步骤如下：
（1）抽提表达载体质粒；
（2）强启动子PGK1基因和CCT基因片段连接；
（3）PGK1-CCT片段与表达载体质粒进行双酶切反应后连接构建重组质粒pPGK1Z-rD-CCT。
4.根据权利要求1所述利用同源重组法构建外源磷酸胞苷胆碱转移酶基因CCT整合表达载体，并检测CCT的表达水平，利用色谱法对转化菌株GM4-CCT的磷脂成分进行分析。
5.根据权利要求1所构建的GM4-CCT菌株，将insulin多肽转入GM4-CCT胞内，并检测insulin在胞内的定位。
6.根据权利要求5所述构建糖尿病小鼠模型，口服携带胰岛素菌株GM4-CCT-insulin，能有效降低糖尿病小鼠血糖。
7.根据权利要求5所述携带胰岛素菌株GM4-CCT-insulin用于治疗糖尿病及其对胰岛素不敏感的代谢综合征的药品或功能性食品。
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