[发明专利]一种月见草叶多糖及其制备方法

权利要求书

1.一种月见草叶多糖在抗氧化方面的应用，所述月见草叶多糖采用以下步骤制得：(1)原料预处理：清洗月见草鲜叶，干燥，粉碎，加入石油醚脱脂；(2)提取：将脱脂后粉末加水超声提取后，离心，收集上清液；(3)醇沉：将步骤(2)所得上清液真空浓缩，乙醇醇沉除去水溶性杂质，并依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤去除小分子杂质得月见草叶粗多糖；(4)脱蛋白：采用Sevage法对步骤(3)所得月见草叶粗多糖进行处理，进一步脱除蛋白类杂质，浓缩，再次醇沉；(5)纯化：采用DEAE-52纤维柱层析技术对步骤(4)所得醇沉后样品溶液进行进一步分离纯化；(6)透析、干燥：收集步骤(5)纯化后洗脱液进行透析12～36h，浓缩透析液，冻干，即得到月见草叶多糖；

所述月见草叶多糖的纯度为80％～90％，糖醛酸含量2％～8％，不含蛋白、核酸、淀粉及酚类物质，主要组分平均分子量为5000～6000Da的非单一组分。

2.根据权利要求1所述月见草叶多糖在抗氧化方面的应用，其特征在于，所述步骤(1)中，月见草叶在45～50℃温度下烘干48～72h后粉碎，过40目筛，向月见草叶粉末中加入石油醚，回流脱脂6h，备用；所述石油醚用量按每克月见草叶粉末计为3～4mL。

3.根据权利要求1所述月见草叶多糖在抗氧化方面的应用，其特征在于，在所述步骤(2)中超声功率为240～400W，液料比为10～30mL/g，超声时间为10～50min，超声温度为35～75℃。

4.根据权利要求1所述月见草叶多糖在抗氧化方面的应用，其特征在于，在所述步骤(3)中根据液体量真空浓缩，向浓缩液中加入一定浓度乙醇至混合液乙醇终体积分数为80％，于4℃静置12～15h，4000r/min离心10min，沉淀依次经无水乙醇、丙酮、乙醚洗脱，4000r/min离心10min，得月见草叶粗多糖。

5.根据权利要求1所述月见草叶多糖在抗氧化方面的应用，其特征在于，在所述步骤(4)中采用氯仿：正丁醇＝4:1组成的Sevage试剂，按照多糖溶液：Sevage试剂的体积比为4:1，对月见草叶粗多糖萃取3～5次，萃取过程可在萃取罐中充分搅拌或用分液漏斗充分震荡后，静置分离或离心分离。

6.根据权利要求1所述月见草叶多糖在抗氧化方面的应用，其特征在于，所述步骤(5)中，上样 量为柱体积的1/10～1/12，控制洗脱流速1mL/min～1.5mL/min，依次用蒸馏水和0.1mol/L、0.2mol/L、0.3mol/L的NaCl溶液洗脱，每2min～4min收集一管，并用苯酚-硫酸法检测多糖，绘制曲线图，并收集单一峰洗脱液。

7.根据权利要求1所述月见草叶多糖在抗氧化方面的应用，其特征在于，所述步骤(6)中，采用膜截留分子量为3500Da超滤装置或透析袋进行，浓缩后，真空冷冻干燥，得月见草叶多糖。