[发明专利]一种基于CRISPRi的共利用葡萄糖和木糖生产N-乙酰氨糖的方法

权利要求书

1.一种基因工程菌，其特征在于，能够共利用葡萄糖和木糖生产N-乙酰氨基葡萄糖；所述共利用葡萄糖和木糖生产N-乙酰氨基葡萄糖是利用dCas9蛋白和sgRNA调控糖酵解、磷酸戊糖及肽聚糖合成三条途径中的zwf，pfkA与glmM基因实现的；所述基因工程菌以枯草芽孢杆菌BSGNY-Pveg-glmS-P43-GNA1为出发菌株。

2.根据权利要求1所述的基因工程菌，其特征在于，基因工程菌整合表达了dCas9蛋白，并整合了三个分别作用于zwf，pfkA与glmM基因的sgRNA表达片段。

3.根据权利要求2所述的基因工程菌，其特征在于，所述dCas9蛋白通过载体pLCx进行整合表达。

4.权利要求3所述基因工程菌的构建方法，其特征在于，以所述枯草芽孢杆菌为出发菌株，以载体pLCx将d Cas9蛋白整合表达，并将作用于zwf，pfkA与glmM基因的sgRNA表达片段用载体psga整合表达。

5.一种共利用葡萄糖与木糖生产N-乙酰氨基葡萄糖的方法，其特征在于，将权利要求1～2任一所述的基因工程菌接种入发酵培养基，发酵生产N-乙酰氨基葡萄糖。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述发酵培养基含有葡萄糖和木糖，或含有能够水解为葡萄糖和木糖的原料。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法是将重组枯草芽孢杆菌接种入含葡萄糖的发酵培养基，在3-9h内添加浓度为5-20g/L的木糖。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述方法是将生产菌株活化后，以5-10％的接种量转入发酵培养基，35-38℃、150-250rpm条件下培养24-60h。

9.权利要求1所述的基因工程菌在食品、日化领域或制备药物、保健品方面的应用。