[发明专利]一种广西金花茶多糖肽的制备方法

说明书

本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种广西金花茶多糖肽的制备方法。本发明提供的广西金花茶多糖肽的制备方法包括脱脂预处理、提取、醇沉、纯化步骤，本发明广西金花茶多糖肽的制备工艺合理，多糖肽提取效率高，纯度高达86.3％，另外，制备的多糖肽抗氧化活性良好，对羟自由基的清除率达到73％，对超氧阴离子自由基的清除率达到81％，为金花茶作为抗氧化、抗衰老保健食品的开发提供理论依据。

技术领域

本发明属于生物提取技术领域，具体涉及一种广西金花茶多糖肽的制备方法。

背景技术

金花茶花色金黄，多数种具蜡质光泽，晶莹可爱，花型有杯状、壶状、碗状和盘状等，形态多样，秀丽雅致，在山茶类群中，被誉为“茶族皇后”。金花茶是一种保健价值很高的药食同源植物，金花茶的花叶均可入药或食用，明代伟大的医药家李时珍在《本草纲目》中早有记载“山茶嫩叶炸熟、水淘，可食，亦可蒸晒作饮”。研究分析发现，金花茶含有400多种对人体有益的化学成份，含有天然有机锗、硒、锰、钒、锌等多种对人体有重要保健作用的微量元素以及维生素、茶多酚、维生素、黄酮、多糖和多种人体必需的氨基酸等。经临床实验证明：金花茶具有降血脂、降胆固醇、降血压、抑制肿瘤生长、抗衰老、激活人体多种酶等特殊保健作用，与医著记载相互吻合，互相应证。

中国专利申请CN106866833A公开了一种具有抗应激作用的金花茶多糖提取物及其制备方法，包括以下步骤：金花茶的细枝或叶打成粗粉，85％乙醇湿渗漉，药渣加水加热回流，95％乙醇沉淀，离心得沉淀。该制备方法简单易行、成本低廉，使用的是平时基本作为废弃物的金花茶的细枝或叶，有利于资源的深入开发，制备的金花茶多糖可应用于抗应激药物、耐疲劳药物、耐缺氧药物、耐寒冷药物以及保健食品，但是采取了高温提取，容易造成活性成分的损失。

多糖肽是一种糖蛋白，是多糖与蛋白质的复合体，具有很高的分子量，由多糖的重复单元组成。多糖肽具有很强的生物活性，研究证实，多糖肽具有重要的药理学作用，可以增强机体免疫功能，具有抗氧化作用，并可以在一定程度上抑制肿瘤细胞的生长，而且相对于多糖，有着口服有效性。

现有提取金花茶有效成分的方法是高温提取，具有保健功能的生理活性物质的部分活性会丧失，而且提取率、纯度低，单位产品原料消耗量大。另外，有关多糖肽的研究逐渐受到关注，广西金花茶是我国特有茶种，国内外对它的研究报道甚少，对其多糖肽制备的研究更是少之又少。

发明内容

为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种广西金花茶多糖肽的制备方法。本发明制备的广西金花茶多糖肽的纯度高达86.3％，且抗氧化活性良好，可用于制备抗氧化、抗衰老等保健产品。

发明提供的一种广西金花茶多糖肽的制备方法，包括以下步骤：

S1、脱脂：金花茶叶片清洗后粉碎，过10-20目筛，得金花茶粉末，取上述所得金花茶粉末10g，加入二氯甲烷和乙醇，二氯甲烷和乙醇体积比为2-5:1-3，60-80℃回流2-3h，得脱脂金花茶；

S2、提取：向步骤S1所得脱脂金花茶中加入蒸馏水和纤维素酶，用质量浓度为5-10％的柠檬酸溶液调节pH值至5.5，40-60℃酶解0.5-1h，高温灭酶，脉冲电场处理后超声提取0.5-2h，3层200目纱布过滤，收集滤液，滤渣加入蒸馏水后同法操作再提取一次，合并滤液，浓缩，得多糖肽溶液；

S3、醇沉：将步骤S2所得多糖肽溶液在不断搅拌中缓慢滴加无水乙醇，磁力搅拌20-40min后2-5℃静置16-24h，10000-15000r/min高速离心，收集乙醇沉淀部分I，离心后的上清液再缓慢滴加无水乙醇，同法操作，收集乙醇沉淀部分II，合并两次收集到的沉淀部分，真空低温干燥，得多糖肽粗品；