[发明专利]三七中三种具有抗肿瘤活性的化合物、制备方法和药物用途

权利要求书

1.具有抗肿瘤活性的化合物，其特征在于，其结构式如下：

式Ⅰ的化合物C₃₆H₆₀O₉，式Ⅱ的化合物C₃₆H₆₀O₁₀。

2.具有抗肿瘤活性的化合物，其特征在于，其结构式如下：

式Ⅲ的化合物C₃₆H₆₀O₉。

3.如权利要求1-2所述的化合物的分离方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)取干燥的三七根10kg粉碎，用70％的乙醇回流提取3次，料液比为1：10，每次回流时间2h，在65℃下减压浓缩，得浸膏1.6kg；

(2)将步骤(1)中浓缩浸膏用蒸馏水溶解后上D101型号大孔吸附树脂，树脂量10.5kg，依次用10％、60％和90％乙醇-水以五倍柱体积洗脱，将60％乙醇段洗脱液65℃减压浓缩；

(3)将步骤(2)中的浓缩浸膏进行硅胶柱层析分离，硅胶80～100目1:1拌样，硅胶200～300目1:20上样，依次用氯仿-甲醇50:1→40:1→30:1→20:1→10:1→8:1→6:1→4:1梯度洗脱，各5个柱体积，经薄层色谱检测合并相同洗脱流份，水浴45℃减压浓缩蒸干，共分离得到8个洗脱段Fr.B1-Fr.B8；

(4)将步骤(3)中Fr.B5 23.5g所得物经预处理ODS中压柱层析分离，用甲醇-水40:60→45:55→50:50→55:45→60:40→65:35→70:30→75:25→80:20→100:0为流动相进行梯度洗脱，共分离得到10个洗脱段Fr.B5-1-Fr.B5-10；

(5)将步骤(4)中Fr.B5-7部分利用半制备液相色谱进行制备，色谱条件：色谱柱：YMC-pack C18 10×250mm,5μm，流动相A:27％乙腈、流动相B:73％水、检测波长：203nm、流速：3mL/min、进样量：100-200μL，收集保留时间27min的馏分，50℃水浴减压浓缩分离得到式Ⅰ化合物；

(6)将步骤(3)中的Fr.B1段10g进行硅胶柱层析分离，硅胶80～100目1:1拌样，硅胶200～300目1:20上样，依次用氯仿-甲醇50:1→40:1→30:1→20:1→10:1进行洗脱，经薄层色谱检测将流份分为5个部分Fr.B1-1-Fr.B1-5；

(7)将步骤(6)中Fr.B1-2所得物经预处理的ODS中压柱层析分离，用甲醇-水70:30→75:25→80:20→100:0为流动相进行梯度洗脱，其中80％甲醇-水流份60℃水浴减压浓缩回收浸膏，进行二次ODS柱分离，得到式Ⅱ化合物；

(8)将步骤(6)中Fr.B1-3进行硅胶柱色谱分离，硅胶80～100目1:1拌样，硅胶200～300目1:20上样，依次用氯仿-甲醇15:1→14:1→13:1洗脱，经薄层色谱检测合并相同流份，水浴45℃减压浓缩，分离得到3个部分Fr.B1-3a-Fr.B1-3c；

(9)将步骤(8)中的流份进一步利用半制备液相色谱进行制备分离，色谱条件：色谱柱：YMC-pack C18 10×250mm,5μm，流动相A:28％乙腈、流动相B:72％水、检测波长：203nm、流速:3mL/min、进样量：100-200μml，收集保留时间22min的馏分，50℃水浴减压浓缩分离得到式Ⅲ化合物。

4.如权利要求1-2所述的化合物在制备预防和治疗肿瘤疾病的药物中的应用。