[发明专利]一种分子探针功能化丙酮酸激酶的纳米传感器快速检测微生物在审
| 申请号： | 201810032114.2 | 申请日： | 2018-01-12 |
| 公开（公告）号： | CN108195811A | 公开（公告）日： | 2018-06-22 |
| 发明（设计）人： | 万逸;宋凤阁;刘红 | 申请（专利权）人： | 海南大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64;C12Q1/689;C12Q1/14;C12Q1/10 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 570228 海南省*** | 国省代码： | 海南;46 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 丙酮酸激酶 分子探针 功能化 微生物 国民经济建设 病害微生物 纳米传感器 荧光仪 病原微生物 快速检测微生物 反应动力学 检测和控制 微生物检测 表达分析 分子水平 快速检测 问题提供 重大意义 作用规律 靶点 研发 灵敏 诊断 参考 海洋 检测 考察 研究 | ||
1.一种分子探针功能化丙酮酸激酶的纳米传感器快速诊断病原微生物，其特征在于：包括丙酮酸激酶被DNA分子探针交联功能化，且用ATP荧光仪诊断微生物。
2.基于权利要求1所述，DNA分子探针功能化的丙酮酸激酶，包括基于大肠杆菌DNA分子探针（GGAGGAAGGGAGTAAAGTTAAT）；沙门杆菌DNA分子探针（GGAGGAAGGGCAGTAAGCT）；金黄色葡萄球菌的DNA分子探针（GGGAAGAACATATGTGTAAGTA）；哈氏弧菌DNA分子探针（GTCGCTAACGTCAAATAATG）。
3.基于权利要求1所述，丙酮酸激酶包括：嗜热脂肪芽胞杆菌来源丙酮酸激酶；老鼠肝脏来源丙酮酸激酶；老鼠肌肉来源丙酮酸激酶；鸡肉来源丙酮酸激酶。
4.基于权利要求1要求所述DNA分子探针功能化丙酮酸激酶，其连接双交联试剂包括：4-(N-马来酰亚胺基甲基)环己烷-1-羧酸琥珀酰亚胺酯；（N-琥珀酰亚胺 6-[4’-叠氮基-2’-硝基苯基氨基]己酯）；（琥珀酰亚胺基 3-[溴代乙酰基氨基]丙酯）；（N-琥珀酰亚胺基碘代乙酯）；（N-琥珀酰亚胺基[4-碘代乙酰基]氨基苯甲酸酯）；（琥珀酰亚胺基4-[p-马来酰亚胺苯基]丁酸盐）；（琥珀酰亚胺基-6-[（β-马来酰亚胺丙酰胺基）]己酯）。
5.基于权利要求1所述丙酮酸激酶催化产生的ATP的工作液，其组分和浓度如下：磷酸化烯醇丙酮酸（1-100 mM）; 5’—二磷酸腺苷（1-100 mM）; 硫酸镁（1-100 mM）。
6.基于权利要求1所述的纳米生物传感器，其包括：磁性微米小球（1-10 微米）；聚苯乙烯小球（1-10微米）。
7.其余权利要求2所述丙酮酸激酶，其可以是携带如下标签：组氨酸标签、铂结合多肽标签和金结合多肽标签。
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