[发明专利]MAGE-A3人源化T细胞受体

说明书

本发明提供了一种人源化改造的T细胞受体(TCR)SRm1g13t，其具有结合人抗原MAGE‑A3:112‑120(KVAELVHFL)与人类白细胞抗原(HLA)复合物：pHLA(MAGE‑A3)的特性；并且所述SRm1g13t对所述pHLA(MAGE‑A3)复合物的结合亲和力是相应鼠源TCR SRm1对pHLA(MAGE‑A3)复合物的结合亲和力的至少2倍。本发明还提供了此类TCR与治疗剂的融合分子。此类TCR可以单独使用，也可与治疗剂联用。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，更具体地涉及能够识别人抗原pHLA(MAGE-A3)的人源化T细胞受体(T cell receptor,TCR)。本发明还涉及所述受体的制备和用途。

背景技术

目前基于表达特异性T细胞受体(TCR)的T细胞免疫治疗越来越受到重视，这种免疫疗法被寄予厚望去消灭肿瘤。这种抗肿瘤的效应是由转入的TCR来介导的，转入的TCR可以识别肿瘤细胞上的肽-人白细胞抗原(pHLA)复合物，从而使T细胞来识别肿瘤细胞，进而使T细胞杀伤肿瘤细胞。近期研究表明，亲和力越高的TCR可以使T细胞发挥更好的抗肿瘤效应。临床试验也表明亲和力提高的NY-ESO-1特异性T细胞不仅表现出安全性也展现出来很好的抗肿瘤疗效。这些数据都表明提高T细胞免疫疗效可以从提高亲和力方面出发。

MAGE-A3在人肿瘤中高度频繁表达，并且它的表达与预后差呈正相关性。研究者已经能够通过用人抗原MAGE-A3:112-120(KVAELVHFL)短肽来免疫HLA-A*02的转基因小鼠已经得到了针对人抗原MAGE-A3的鼠源TCR。这个鼠源TCR展示出了良好的抗肿瘤效应并且也进行了临床试验研究(Chinnasamy,N.,et al.,J Immunol,2011.186(2):p.685-96.)。

但是，人体为了防止产生自身免疫反应，高亲和力的TCR已经在胸腺中被剔除了，因而在人体的TCR库中找到高亲和力的TCR是非常困难的。不过研究发现当T细胞表达高亲和力TCR时，T细胞的激活是不需要CD8的辅助。然而老鼠的CD8无法有效的和人的HLA的α3有效的结合，因而在HLA转基因老鼠体内找到针对人肿瘤抗原的高亲和力鼠源的TCR是相对容易很多的。并且已经有大量的文章报导鼠源TCR可以发挥很好的抗肿瘤反应，因而高亲和鼠源的TCR有着相当大的优势和潜能被应用于抗肿瘤的免疫治疗。

然而鼠源的TCR对于人体而言存在免疫原性，会使人体产生宿主免疫应答，从而产生针对鼠源TCR的抗体，这极有可能会使回输的转入鼠源TCR的T细胞被清除掉。研究者目前已经发现，当病人回输转入针对人抗原p53或者gp100的鼠源TCR的T细胞时，病人体内产生了针对鼠源TCR的抗体。同时也发现当病人回输转入针对人抗原CEA的鼠源TCR的T细胞时，病人在治疗后的3-4个月产生了针对鼠源TCR的抗体，这些抗体也抑制了表达鼠源TCR的PBL产生IFN-γ的释放能力。虽然目前的数据没有给出明确的答案来说抗鼠源TCR的抗体会影响抗肿瘤的效果，但是鼠源TCR的免疫原性是不可避免的会影响机体产生抗体，这种影响必须被受到重视以防止鼠源TCR被应用到临床产生不必要的影响。

众所周知，人源化抗体的产生已经克服了鼠源抗体的免疫原性，并且取得了相当大的成就，目前已经能够有很多上市的人源化抗体被应用于治疗。人源化抗体是通过将互补决定区(complementarity determining regions，CDRs)进行移植得到的，主要就是将鼠源的CDR区替换到人抗体可变区的骨架上。虽然CDR移植保留了识别抗原的能力，但是这种识别抗原的亲和力经常都是降低的。这种现象可能是因为鼠源CDR移植到人抗体骨架上使得鼠源CDR构象发生了改变。

因此，本领域亟待开发对鼠源的TCR进行人源化改造的方法，从而得到高亲和力、低免疫原性的人源化CDR，用于肿瘤等疾病的治疗。

发明内容

本发明的目的在于提供一种对人抗原pHLA(MAGE-A3)具有较高亲和力的人源化TCR。