[发明专利]一种用于急性心肌梗死合并心脏破裂筛检的基因及其表达产物

权利要求书

1.一种用于急性心肌梗死合并心脏破裂筛检的基因及其表达产物，其特征在于：PF4基因及其表达产物在急性心肌梗死合并心脏破裂筛检中的用途。

2.根据权利要求1所述的一种用于急性心肌梗死合并心脏破裂筛检的基因及其表达产物，包括PF4基因及其表达产物制备的急性心肌梗死合并心脏破裂预测标志物和诊断制剂，其特征在于：所述PF4基因及其表达产物在制备急性心肌梗死风险预测标志物和诊断制剂中的用途。

3.根据权利要求2所述的一种用于急性心肌梗死合并心脏破裂筛检的基因及其表达产物，其特征在于：所述急性心肌梗死合并心脏破裂预测标志物和诊断制剂采用常规PCR相对定量，荧光定量试剂盒、蛋白杂交、酶联免疫方法、基因芯片检测受试者或急性心肌梗死患者外周血中基因的表达水平。

4.根据权利要求1所述的一种用于急性心肌梗死合并心脏破裂筛检的基因及其表达产物，其特征在于：所述PF4基因及其表达产物以受试者或急性心肌梗死合并心脏破裂患者外周血提取的RNA为模板，荧光定量检测PF4基因mRNA表达水平使用的特异性检测引物对序列，其序列如下所示：

上游引物：5’TGTGTGAAGACCACCTC 3’

下游引物：5’CACGTAGGCAGCTAGT 3’

5.根据权利要求4所述的利用PF4基因及其表达产物对急性心肌梗死合并心脏破裂诊断和风险预测的检测方法，其特征在于：

步骤一：准备荧光定量PCR检测中使用的PF4引物对序列，上游引物序列：5’TGTGTGAAGACCACCTC 3’，下游引物序列：5’CACGTAGGCAGCTAGT 3’；

步骤二：荧光定量PCR反应体系，20ul反应体系，每个反应包括：10ul SYBR Premix ExTaq TM；

步骤三：加入无核酸酶的双蒸水和cDNA模板，将步骤一所述准备的上、下游引物各取0.5ul(浓度为10umol/L)，并加入无核酸酶的双蒸水8ul，cDNA模板1ul；

步骤四：应用实时荧光定量PCR系统扩增。将步骤二和步骤三所述混合，在60-95℃下反应30-600s，进行40次循环；

步骤五：测量，以GAPDH基因为内参基因，将步骤四所述的所有样本重复测量≥3次，结果取均值；

步骤六：比较，将步骤五所述的每个样本所得循环阈值(Ct)以相对表达量2-ΔCt表示(ΔCt＝目的基因Ct-内参基因Ct)，并进行比较。