[发明专利]一种快速检测微量氟虫腈的胶体金标试纸条及其制备方法

说明书

本发明公开了一种快速检测微量氟虫腈的胶体金标试纸条及其制备方法，所述试纸条底层为支撑层，中间层为吸附层，保护层固定在吸附层上，吸附层从测试端依次为吸附纤维层、金标抗体纤维层、纤维素膜层及手柄端的吸水材料层，其中在纤维素膜上喷涂有偶联氟虫腈的载体蛋白作为检测线，还设有用羊抗或兔抗小鼠IgG、羊抗兔IgG抗体或SPA印制的质控线。试验表明，本试纸具有较强的特异性和较高的灵敏度，检测限为10ng/mL，与其他农药或兽药无交叉反应。

技术领域

本发明涉及一种快速检测微量杀虫剂药物的器具，特别是涉及一种快速检测微量氟虫腈的胶体金标试纸条及其制备方法。

背景技术

氟虫腈，商品名称锐劲特，英文通用名称芬普尼(fipronil)，化学名称(RS)-5-氨基-1-(2,6-二氯-a,a,a-三氟-对-甲苯基)-4-三氟甲基亚磺酰基吡唑-3-腈，分子式为C₈N₂Cl₄，分子式C12H4Cl2F6N4OS，分子量437.2，是法国罗纳普朗克公司1981年开发的苯基吡唑类杀虫剂。从上世纪90年代中期开始使用，是一种世界范围内应用广泛的广谱杀虫剂和兽药，主要用于农作物害虫控制，家庭宠物寄生虫的治疗与控制，公共卫生娱乐场所害虫防控等各方面的得到广泛应用。它通过与γ-氨基丁酸受体结合，有效抑制昆虫中枢神经系统中γ-氨基丁酸调节的氯离子通道，并且与这个通道有很高的亲和力，从而干扰虫体中枢神经系统，导致其神经及肌肉兴奋过度兴奋而死亡。大量的试验结果表明不同浓度的氟虫腈悬浮溶液、粉剂或颗粒剂通过叶面喷雾、种子包衣、拌土撒施等方式对水稻害虫如螟虫、褐飞虱、灰飞虱及稻水象甲作用效果良好。对牧场蝗虫防止效果也特别好，防治率达73％以上。对蚊子，草地红火蚁也有特别好的防治效果。氟虫腈本身对哺乳动物γ-氨基丁酸调节的氯离子通道亲和力相对较低，因此认为对哺乳动物安全性比较高。然而随着研究的深入，氟虫腈的负面影响逐渐显现，氟虫腈在机体内被代谢成很多代谢产物包括砜化物、亚砜化合物、硫化物，脱亚磺酰基化合物，实际上氟虫腈的这些主要代谢产物对哺乳动物γ-氨基丁酸调节的氯离子通道亲和力更强，并产生有害效应，已有的试验结果证明，代谢物砜化物对鸟类、脊椎动物动物的毒性均比氟虫腈本身的毒性更高，脱亚磺酰基化合物也有同样的表现。这些代谢产物通过吸收、代谢、排泄、水解及光解作用，广泛分布于动物的各个组织中，主要作用于含高脂肪器官，特别是脂肪组织、肾上腺及肝脏，以及其他组织如甲状腺，肾脏，损害动物繁殖性能，且作用持久，并通过富集作用，沉积在组织中，通过食物链危害人体健康，导致人呕吐，焦虑不安，癫痫等可见的症状。其对环境、生态系统及人类健康的影响愈来愈受到人们的普遍关注。欧盟委员会还是从2013年限制了氟虫腈的使用范围。联合国粮农组织和世界卫生组织对粮油、蔬菜、水果和动物产品中氟虫腈含量做了最高残留限量，其中牛奶、牛肾及禽蛋为0.02mg/kg，牛肝0.1mg/kg，牛肉0.5mg/kg，禽肉为0.01mg/kg。我国GB2763也对粮油、蔬菜、水果、糖料及食用菌残留限量做了规定，除了(鲜食)玉米为0.1mg/kg外，其他皆为0.02mg/kg。

目前国内外检测氟虫腈残留的方法主要采用理化分析方法，主要是色谱法，包括液相色谱法-串联质谱法(LC-MS/MS)、气相色谱法(GC)、液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS)、气相色谱质谱联法(GC-MS)等，这些方法检测氟虫腈需经一系列复杂的前处理净化过程，繁琐费时，从样品预处理到得出检测结果至少需要2天时间，同时需要大型专门的仪器设备和专业技术人员操作，不能满足需求快速检测需求，时效性较差。氟虫腈免疫试剂盒测法尽管灵敏度较高，分析过程相对简单，但也需要2-3个小时的检测过程，而且需要酶标仪辅佐，不能进行现场实时监测。试纸条检测时目前药物残留快速筛查的主要手段，对氟虫腈的筛查有独特优势，是需要优先发展的检测技术，但目前氟虫腈试纸快速检测方法在国内尚属空白。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种特异性强、灵敏度高的快速检测微量氟虫腈的胶体金标试纸条及其制备方法。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：