[发明专利]一种糖化血红蛋白的检测方法在审
申请号: | 201810001598.4 | 申请日: | 2018-01-02 |
公开(公告)号: | CN108333249A | 公开(公告)日: | 2018-07-27 |
发明(设计)人: | 焉梦寒;王国立;佟雪梅;李运涛;周晓光 | 申请(专利权)人: | 杭州意诚默迪生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N27/62 | 分类号: | G01N27/62 |
代理公司: | 北京正理专利代理有限公司 11257 | 代理人: | 赵晓丹 |
地址: | 310018 浙江省杭州市经济技术*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 糖化血红蛋白 待测品 稀释 糖化 待测样品溶液 蛋白质谱 血样 检测 飞行时间质谱仪 定量分析 待测样品 干燥结晶 检测误差 去离子水 变异体 糖基化 体积比 质荷比 质谱图 靶板 基质 全血 芯片 采集 保证 | ||
1.一种糖化血红蛋白的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)采集全血,用去离子水稀释,形成稀释血样待测品;
2)将稀释血样待测品与SA基质按照体积比为1:8混合,形成待测样品溶液;
3)将待测样品溶液点在芯片靶板上,静置直至溶液完全干燥结晶;
4)在飞行时间质谱仪上进行质谱检测,获得待测样品在3000-20000Da范围的质谱图,得到糖化蛋白质谱峰面积A和相应的非糖化血红蛋白质谱峰面积B;
5)通过质谱峰面积计算得出糖化血红蛋白的占比为A/(A+B)*100%。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤4)当所述糖化蛋白为β链缬氨酸被糖基化的糖化蛋白,相应的所述非糖化血红蛋白为β链携带缬氨酸的血红蛋白;当所述糖化蛋白为α链携带精氨酸被糖基化的糖化蛋白,相应的所述非糖化血红蛋白为α链携带精氨酸的血红蛋白。
3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述质谱检测时设置飞行时间质谱仪参数为加速电压20kv,聚焦质量15000,激光脉冲频率1kHz,激光脉冲能量12μJ。
4.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述飞行时间质谱仪是基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪。
5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述SA基质是芥子酸溶于体积比为3:7的乙腈和浓度为0.1%的三氟乙酸混合液得到的,所述芥子酸的终浓度为10mg/ml。
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