[发明专利]一种包含脱细胞羊膜的复合膜及其制备方法

说明书

本发明涉及生物医药技术领域，涉及一种包含脱细胞羊膜的复合膜、所述复合膜的用途，以及制备所述复合膜的方法。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，涉及一种包含脱细胞羊膜的复合膜、所述复合膜的用途，以及制备所述复合膜的方法。

背景技术

羊膜(AM)位于胎盘内层，呈半透明状，质地柔软，富含多种生长因子和细胞因子，目前已应用于一些软组织修复相关的临床治疗及动物实验中，例如用于皮肤移植、角膜表面重建、糖尿病溃疡的治疗等。羊膜的修复作用是主要通过释放相关因子，抑制炎症反应，促进再表皮化，抑制成纤维化以及减少瘢痕形成等实现的。最近的研究发现，羊膜可以通过调节炎症环境，促进M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞转变，抑制炎症反应，促进再生。这些特点表明，羊膜是用于软组织修复的理想组织工程材料。

新鲜的羊膜保持了优异的生物活性和结构，但新鲜羊膜保存和运输的费用昂贵，限制了其广泛应用。已有的羊膜保存方法包括湿法保存和干法保存，目前湿法保存的羊膜制品有等；直接干燥保存的羊膜虽然降低了保存和运输成本，但其力学性能差，易碎。目前有很多研究人员利用一些化学或酶交联剂通过交联作用提高羊膜的稳定性、力学性能和可操作性。但是这些方法的作用有限，而且处理过程中可能会损失羊膜中的部分生物活性物质，引入的化学物质还可能影响其生物相容性。还有一些方法利用羊膜的提取物或将提取物制备成水凝胶形式。这些方法在一定程度上保留了羊膜的活性物质，但却完全破坏了羊膜的天然结构，所述羊膜的天然结构也被证明具有促进再上皮化的作用。

发明内容

在本发明中，除非另有说明，否则本文中使用的科学和技术名词具有本领域技术人员所通常理解的含义。并且，本文中所涉及的实验室操作步骤均为相应领域内广泛使用的常规步骤。同时，为了更好地理解本发明，下面提供相关术语的定义和解释。

本发明所述的羊膜是胎盘的最内层，是一种透明，无神经、血管、淋巴管，且具有韧性的组织。天然羊膜由上皮细胞层、基底膜、基质层、纤维母细胞层和海绵层组成。天然羊膜可以分成两面，具有上皮层的一面为上皮面(epithelial side)(除去上皮细胞层之后，就是具有基底膜的那一面)，与之对应的另一面是基质面(stromal side)，也就是具有海绵层的那一面。将天然羊膜进行处理，除去上皮细胞层，得到脱上皮细胞羊膜，其由基底膜、基质层、纤维母细胞层和海绵层组成；或者除去上皮细胞层和纤维母细胞层，得到全脱细胞羊膜，其由基底膜，基质层和海绵层组成。本发明所述的脱细胞羊膜(dAM)包括脱上皮细胞羊膜和全脱细胞羊膜，所述脱细胞羊膜的基质面是指脱细胞羊膜上具有海绵层的一面。

如本文中使用的，术语“电纺丝”又称“静电纺丝”，是指利用聚合物溶液或熔体在高压电场的作用下形成纤维的过程，包括使带电荷的聚合物溶液或熔体在静电场中流动与变形，然后经溶剂蒸发或熔体冷却而使喷出的聚合物溶液束或熔体束固化，得到纤维。电纺丝可以得到纳米纤维或微米纤维。电纺丝的装置通常包括：高压电源、溶液储存装置、喷射装置和收集装置。传统的收集方式中，纤维以无规的方式散落在收集装置上，以非织造物的形式存在；而使用特定的收集方式，可以得到在一定程度上沿纤维轴向平行的纤维。

如本文中使用的，术语“纤维”是指长度与宽度之比高的(例如大于100)、相对柔韧的、相对均匀的物体，所述宽度是指垂直于其长度的横截面的直径。纤维的横截面可以是任何形状，例如圆形或非圆形。就非圆形横截面的纤维而言，术语“直径”是指最大的横截面尺寸。

如本文中使用的，术语“纳米纤维”在广泛意义上是指具有小于约5000nm、小于约1000nm、小于约800nm、小于约500nm或小于约100nm的直径的纤维。术语“微米纤维”是指具有小于约100μm、小于约80μm、小于约50μm或小于约10μm的直径的纤维。纳米或微米纤维可以是中空的，或沿其纵截面方向压扁的丝带状纤维。

本发明所述的“纤维层”主要由纤维构成，也可以含有其他物质(例如营养物质、细胞外基质、细胞因子和/或药物活性成分)，所述纤维可以无规分布，或在一定程度上平行分布。纤维之间可以相互缠绕或搭接。