[发明专利]从尿液细胞直接逆分化为角质形成细胞干细胞的方法及利用逆分化的角质形成细胞干细胞的用于促进皮肤再生的组合物的制备方法

说明书

本发明涉及通过引入逆分化因子Bmi1及dNP63a来诱导尿液细胞逆分化为角质形成细胞干细胞的方法以及包含所诱导的逆分化角质形成细胞干细胞条件培养基作为有效成分的用于促进皮肤再生的组合物。

技术领域

本发明涉及从尿液细胞直接逆分化为角质形成细胞干细胞直接逆分化方法及利用逆分化的角质形成细胞干细胞的用于促进皮肤再生的组合物的制备方法。

背景技术

干细胞(stem cell)是指根据体内的特殊条件和环境，或达到自身需要的程度，能够分化为具有无限的自我增殖能力和分化为对人体所需的特定细胞和组织能力的细胞。干细胞分为三种类型，其类型包括从早期胚胎分离的胚胎干细胞(embryonic stem cell，ES细胞)、从胚胎原始生殖细胞分离的胎生殖细胞(embryonic germ cell，EG细胞)及从成年骨髓分离的多能成体祖细胞(multipotent adult progenitor cell，MAPC细胞)。

干细胞具有发展为具有特定功能的细胞的潜力，因此正在被成为作为用于各种器官功能恢复的细胞治疗剂的研究对象，最近其应用范围扩展到整容和美容。

成体干细胞在人体中的作用可以通过两种方式来概括：第一，干细胞本身可以分化并再生为人体中受损的组织和细胞；其次，在整个生命过程中持续分泌蛋白质如生长因子及细胞因子，从而有助于邻近细胞的生长及再生。

角质形成细胞干细胞是指位于皮肤深处的单层组织的一部分，在皮肤再生中起到关键作用。在上层的皮肤受到损伤(damage)或老化并剥落时的情况下，其主要作用之一是从角质形成细胞干细胞中分化一部分细胞来形成新的皮肤细胞，因此，在内部的角质形成细胞干细胞被破坏的情况下，由烧伤或深层伤口引起的皮肤组织再生困难。角质形成细胞干细胞是一种成体干细胞，为了采集，必须进行伴随疼痛的侵入性医疗行为，由此可获得的细胞的量也可以说是针对于收集治疗材料是极微量的。

直接逆分化(direct reprogramming)方式是可将体细胞转化为所需的其他类型的细胞的技术。与日本山中教授的逆分化(reprogramming)不同，由于不会经历多能干细胞状态，因此具有逆分化的时间少且效率高，同时可解决多能干细胞发生肿瘤的危险或再分化费用等。

使用通过利用干细胞技术的具有抗炎及伤口愈合效果的干细胞培养液(conditioned mdeium)的药品材料的开发技术在开拓相对于成功可能性微乎其微的疾病治疗剂开发可能性高且前景明确的新市场并提出新型生物产业的模型方面具有重大意义。

在角质形成细胞干细胞的情况下，除了简单的细胞替换作用外，还具有分泌在皮肤再生中起到重要作用的各种生长因子及细胞因子等蛋白质的作用。因此，在开发皮肤再生治疗制剂中使用作为皮肤再生的专家(specialist)的角质形成细胞干细胞是一种合乎逻辑且科学的极其理所当然的接近方式。

为此，本发明人发现了一种通过引入逆分化因子Bmi1及dNP63a而过表达的尿液细胞来诱导具有与角质形成细胞干细胞相似特性的逆分化角质形成细胞干细胞的方法，通过利用逆分化角质形成细胞干细胞来生产条件培养基，评估皮肤再生功效并筛选预期有关的主要因子来完成了本发明。

发明内容

发明所要解决的问题

本发明的目的在于，提供诱导尿液细胞逆分化为角质形成细胞干细胞的组合物。

本发明的再一目的在于，提供诱导尿液细胞逆分化为角质形成细胞干细胞的方法。

本发明的另一目的在于，提供利用从尿液细胞逆分化的角质形成细胞干细胞的条件培养基制备方法。

本发明的还有一目的在于，提供包含利用从尿液细胞逆分化的角质形成细胞干细胞制备的条件培养基作为有效成分的皮肤再生及皮肤伤口愈合用组合物。

用于解决问题的方案