[发明专利]基因组编辑方法

权利要求书

1.一种经基因组编辑的细胞或非人生物的制造方法，包括将

(a)切断基因组编辑对象区域的两端的人工核酸酶系统、和

(b)单链DNA

导入细胞或非人生物的工序，

所述(b)单链DNA包含从5′侧开始以5′侧同源臂序列、供体DNA序列、3′侧同源臂序列的顺序配置的碱基序列，所述5′侧同源臂序列是所述基因组编辑对象区域外侧的一边的碱基序列的同源序列，且所述3′侧同源臂序列是所述基因组编辑对象区域外侧的另一边的碱基序列的同源序列。

2.根据权利要求1所述的方法，所述人工核酸酶系统是CRISPR/Cas系统。

3.根据权利要求1或2所述的方法，将所述人工核酸酶系统和所述单链DNA通过电穿孔法导入所述细胞或非人生物。

4.根据权利要求3所述的方法，所述供体DNA序列包含2处重组酶识别序列，所述人工核酸酶系统和所述单链DNA的导入对象是包含重组酶表达盒的受精卵。

5.根据权利要求1～4的任一项所述的方法，所述5′侧同源臂序列的长度为110碱基长以上。

6.根据权利要求1～4的任一项所述的方法，所述5′侧同源臂序列的长度为130碱基长以上。

7.根据权利要求1～4的任一项所述的方法，所述5′侧同源臂序列的长度为260碱基长以上。

8.一种基因组编辑用组合物，包含

(a)切断基因组编辑对象区域的两端的人工核酸酶系统、和

(b)单链DNA，其包含从5′侧开始以5′侧同源臂序列、供体DNA序列、3′侧同源臂序列的顺序配置的碱基序列，所述5′侧同源臂序列是所述基因组编辑对象区域外侧的一边的碱基序列的同源序列，且所述3′侧同源臂序列是所述基因组编辑对象区域外侧的另一边的碱基序列的同源序列。

9.一种基因组编辑用试剂盒，包含

(a)切断基因组编辑对象区域的两端的人工核酸酶系统、和

(b)单链DNA，其包含从5′侧开始以5′侧同源臂序列、供体DNA序列、3′侧同源臂序列的顺序配置的碱基序列，所述5′侧同源臂序列是所述基因组编辑对象区域外侧的一边的碱基序列的同源序列，且所述3′侧同源臂序列是所述基因组编辑对象区域外侧的另一边的碱基序列的同源序列。