[发明专利]用于对HPV16阳性癌的治疗控制的血清学测试

说明书

本发明涉及HPV16阳性癌的治疗控制方法，用于相应诊断方法的抗体以及用于进行该方法的测试。具体地，本发明涉及用于监测样品中抗体的量的发展的血清学方法，所述样品是在HPV16阳性癌的治疗之前和之后在预定的一段时间中从患者获得的。此外，本发明提供了试剂盒形式的免疫学测试，利用该测试可以进行本发明的方法。

本发明涉及用于HPV16阳性癌的治疗控制的方法，用于相应诊断方法的抗体以及用于进行该方法的测试。具体地，本发明涉及用于监测样品中抗体的量的发展的血清学方法，所述样品是在HPV16阳性癌的治疗之前和之后在预定的一段时间中从患者获得的。此外，本发明提供了试剂盒形式的免疫学测试，利用该测试可以进行本发明的方法。

与此同时，已知超过100种人乳头瘤病毒(human papilloma virus，HPV)，其可感染皮肤或多种黏膜的上皮细胞。HPV感染广泛传播，不同的HPV类型导致不同的临床表现。1型HPV和2型HPV引起手足疣，而6型HPV和11型HPV引起生殖器疣。在许多情况下，这种感染没有临床症状，但其也可以导致受影响的上皮细胞的肿瘤样生长。尽管这些肿瘤大多是良性的，并且如上所述，仅导致疣的形成，但同时已经证实一些HPV也可以引起恶性变化并因此导致癌症的发展，例如在生殖器区域中，但也在口或喉中。

这些恶性肿瘤的可选治疗方法是手术、放射治疗、化学治疗、免疫治疗或这些方法的组合。在治疗HPV阳性癌之后的治疗控制的情况下，需要检测体内剩余的肿瘤细胞，以及复发或早期转移，以便在可见继发性肿瘤形成之前恢复治疗，例如通过化学治疗或免疫治疗进行。

多种出版物涉及患者血清中HPV特异性抗体的测定以及获得的数据对HPV阳性癌的发生或复发的诊断和预后价值。

特别适用于推断诊断或预后值的是所谓的肿瘤抗原，即特定的抗原结构，它们是肿瘤细胞的一部分并且对其具有特异性，并且被免疫系统识别并且可以引起免疫应答。然而，所谓的肿瘤抗原HPV E6和HPV E7仅在有限程度上是合适的，因为这些蛋白质抗原出现在所有HPV类型中，其在很大程度上是同源的，因此不允许进行类型特异性的评估，即使在例如将HPV16特异性E6或E7蛋白用于血清学检测时也不允许。然而，血清学响应的这种类型特异性检测对于确定免疫系统对引起肿瘤的HPV类型的反应是必要的，而例如对于足上的良性疣的免疫应答(这会被认为是假阳性结果并且可能对患者造成致命后果)则不是必要的。

HPV是dsDNA病毒。未包封的病毒体由二十面体衣壳组成。尤其是L1(晚期蛋白1)决定HPV的衣壳形成，并且主要负责HPV类型的免疫原性。

AfGeijerstam等在Journal of Infectious Diseases，177，1998，1710-1714中描述了一项研究，其中初产妇女中HPV16衣壳特异性抗体的血清水平在直至第二次妊娠之前的一段时间中被确定。从该研究中可以推断，血清中HPV16衣壳特异性抗体的量在数年中保持稳定，并且抗体的量与性伴侣的数量相关，但与医学状况无关。

另外的研究涉及的问题是，HPV16感染是否代表宫颈癌后期发生的危险因素(Shah等，Cancer Epidemiology，BiomarkersPreventions，6，1997，233-237)。血清中较大量的HPV16衣壳抗体的存在与宫颈癌发生的较高风险相关。在测试中还发现HPV16衣壳抗体在7至13年的时间中没有明显消退。

Koslabova等在International Journal of Cancer，133，2013，1832-1839中指出，在肿瘤患者治疗之后观察到对HPV16病毒样颗粒(virus like particle，VLP)即衣壳的长期血清阳性。这意味着治疗之后L1特异性抗体量的降低看起来不适合作为成功治疗的控制。在概述中提到，对HPV16衣壳抗原具有特异性的抗体的效价在治疗之后的观察期内没有变化。因此，L1无法代表可适合于监测发展或甚至检测复发的标志物。