[发明专利]针对FZD10的单克隆抗体及其用途

说明书

本发明涉及针对FZD10的单克隆抗体。此外，本发明提供使用该抗体诊断FZD10相关疾病的方法、检测出FZD10蛋白质的方法、判定通过FZD10抑制剂的治疗后的药效的方法、筛选通过FZD10抑制剂的治疗效果较高的对象的方法、以及包含该抗体的诊断试剂。

技术领域

本发明涉及针对FZD10的单克隆抗体、使用该抗体诊断FZD10相关疾病的方法、检测出FZD10蛋白质的方法、判定通过FZD10抑制剂的治疗后的药效的方法、筛选通过FZD10抑制剂的治疗效果较高的对象的方法、以及包含该抗体的诊断试剂。

背景技术

Frizzled蛋白是对于Wnt蛋白配体具有结合位点的G蛋白结合受体的家族。根据基因分析，目前已经确定了18种Wnt基因和10种Frizzled基因(FZD1～FZD10)，并且已经发现它们全部在结构上都高度相似。

Frizzled蛋白是七次跨膜蛋白，并且在N末端具有细胞外富含半胱氨酸的结构域。这种富含半胱氨酸的结构域是Wnt配体的结合位点。Wnt配体和Frizzled受体之间的结合不一定是一对一的，并且已经证实一种Wnt配体与多种Frizzled受体结合、一种Frizzled受体与多种Wnt配体结合。

通常认为，通过Wnt配体与Frizzled受体的结合，可以使Wnt信号传导途径活化。能够想到：Wnt信号传导途径中使β-连环蛋白途径活化的物质；存在数种不经由β-连环蛋白的途径，并且通过Wnt配体和Frizzled受体的组合而使不同的途径活化的物质。

通过受体结合而活化的Wnt/β-连环蛋白信号途径，通过与Frizzled受体直接相互作用的细胞质蛋白质即Dishevelled(Dsh)的介导，得到β-连环蛋白在细胞质中的稳定化和蓄积。在不存在Wnt信号传导的情况下，β-连环蛋白局部存在于包含肿瘤抑制蛋白即腺瘤性结肠息肉(APC)和轴蛋白(Axin)的细胞质的分解复合体中。这些蛋白质作为使糖原合成酶激酶(GSK)-3β与β-连环蛋白结合、磷酸化，并且使其指定用于通过泛素/蛋白酶体途径的分解中的重要基础而发挥作用。(专利文献1)已经表面β-连环蛋白非依赖性途径涉及许多的过程，存在涉及细胞骨架系统的控制的细胞内平面极性(PCP)、涉及细胞的运动和粘接的Wnt/Ca²⁺途径、涉及经由蛋白激酶A的肌生成的控制的途径等。Frizzled受体可以二聚体化，并且有报告(非专利文献1)表明该二聚体化涉及Wnt信号传导途径的活化。

就FZD10(参考序列:Genbank登录号NM_007197.3(SEQ ID NO:21))mRNA而言，有报告(专利文献1～2，非专利文献2～3)表明其在包括宫颈、消化道和胶质母细胞瘤的细胞株等多种癌细胞株中，并且在约40％的原发性胃癌、原发性结肠癌和大多数的滑膜肉瘤组织中被上调。作为与FZD10蛋白质的过表达相关的疾病，可举出：滑膜肉瘤、结直肠癌(大肠癌)、胃癌、慢性骨髓性白血病(CML)、以及急性骨髓性白血病(AML)等(专利文献3～5)。因此，FZD10被认为是抗癌剂的合适靶标，已表明：通过FZD10特异性的siRNA，可以抑制滑膜肉瘤细胞的增殖，并且针对FZD10的抗体在滑膜肉瘤的小鼠移植模型中具有抗肿瘤活性(专利文献3和4)。此外，可以预期针对FZD10的单克隆抗体可用作治疗中的诊断剂。除了针对乳腺癌、恶性淋巴瘤、以及结肠癌的曲妥珠单抗的诊断剂、利妥昔单抗的诊断剂、以及贝伐单抗的诊断剂等单克隆抗体的临床应用的成功案例以外，针对其他分子靶标的几种单克隆抗体正在研发中，其诊断效果正在评价中。从选择对治疗剂有效果的患者的观点来看，期待这些诊断剂与更有效的治疗方法密切相关。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：WO2007/053577

专利文献2：WO2004/020668

专利文献3：WO2005/004912

专利文献4：WO2006/013733