[发明专利]以RNA通过干细胞分化诱导胰脏β细胞在审
| 申请号： | 201780071029.0 | 申请日： | 2017-11-16 |
| 公开（公告）号： | CN109963938A | 公开（公告）日： | 2019-07-02 |
| 发明（设计）人： | 王继武;倪毓辉;赵媛媛 | 申请（专利权）人： | 美国绿阳生物技术及医药公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071;A61K35/39 |
| 代理公司： | 北京律盟知识产权代理有限责任公司 11287 | 代理人： | 林斯凯 |
| 地址： | 美国加利*** | 国省代码： | 美国;US |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 胰脏β细胞 内胚层 多能干细胞诱导 干细胞分化诱导 内分泌细胞 胰脏 诱导 分化 发现 | ||
1.一种诱导干细胞分化成感测葡萄糖的胰岛素分泌胰脏β细胞的方法，其包含以下步骤：
(a)在分化条件下培养诱导的多能干细胞作为起始细胞；
(b)诱导所述起始细胞脱离多能状态朝向中内胚层谱系；
(c)以有效剂量且在特定时间窗内通过用mRNA的第一组合进行培养细胞转染来引导分化细胞朝向内胚层细胞；
(d)进一步通过用mRNA的第二组合进行转染来引导所述内胚层细胞朝向胰脏祖细胞；
(e)进一步用mRNA的第三组合使所述胰脏祖细胞成熟化为胰脏内分泌细胞；和
(f)收集富含响应于环境葡萄糖且能够分泌胰岛素作为响应的胰脏β细胞的集群。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第一组合包含FoxA2 mRNA。
3.根据权利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第一组合包含Sox17 mRNA。
4.根据权利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第一组合包含FoxA2 mRNA和Sox17mRNA。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第一组合包含FoxA2 mRNA、Sox17mRNA、GATA4 mRNA和GATA6 mRNA。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第二组合包含PDX1 mRNA、Hlxb9mRNA、Ptf1a mRNA、ixl1 mRNA、HNF1a mRNA和HNF1b mRNA以及Sox9 mRNA中的至少一种。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述mRNA的第三组合包含PDX1 mRNA、NKX6.1mRNA、NKX2.2 mRNA、Pax6 mRNA、Pax4 mRNA、Hlxb9 mRNA和Ngn3 mRNA中的至少一种。
8.根据权利要求1所述的方法，其中影响胰脏β细胞命运定型的所述mRNA包含NKX6.1mRNA、MAFA mRNA或MAFA mRNA中的至少一种。
9.根据权利要求1所述的方法，其中所述起始细胞收集自个体的体液或组织。
10.一种细胞，其通过根据权利要求1所述的方法获得。
11.一种用于治疗疾病、病症或畸形的组合物，其包含根据权利要求10所述的细胞。
12.一种治疗疾病、病症或畸形的方法，其包含向有需要的个体投与根据权利要求9所述的细胞和根据权利要求11所述的组合物中的至少一种的步骤。
13.根据权利要求12所述的方法，其中所述细胞衍生自接受者个体。
14.根据权利要求12所述的方法，其中所述起始细胞收集自接受者。
15.一种产生诱导的感测葡萄糖的胰岛素分泌胰脏β细胞的方法，其包含以下步骤：
(a)在分化条件下培养诱导的多能干细胞作为起始细胞；
(b)诱导所述起始细胞脱离多能状态朝向中内胚层谱系；
(c)以有效剂量且在特定时间窗内通过用mRNA的第一组合进行培养细胞转染来引导分化细胞朝向内胚层细胞；
(d)进一步通过用mRNA的第二组合进行转染来引导所述内胚层细胞朝向胰脏祖细胞；
(e)进一步用mRNA的第三组合使所述胰脏祖细胞成熟化为胰脏内分泌细胞；和
(f)收集富含响应于环境葡萄糖且能够分泌胰岛素作为响应的胰脏β细胞的集群。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于美国绿阳生物技术及医药公司，未经美国绿阳生物技术及医药公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201780071029.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
