[发明专利]连续病毒清除的验证

说明书

本文公开了用于验证连续病毒清除的方法，所述方法包括以下步骤：提供待验证的探针，以有效方式对探针加标，进行病毒清除，对加标探针进行采样和分析步骤d)的加标探针的样品。

相关申请的交叉引用

本申请是根据专利合作条约的国际申请，其要求2016年10月21日提交的EP申请No.16194959.9的优先权，其内容通过引用以其整体并入本文。

用于生产治疗性蛋白质的连续处理变得越来越重要，并且正在出现用于实现真正连续体系的首要解决方案。用于生产治疗性蛋白质的连续过程的一个必需的部分是病毒灭活。Klutz等人引入了螺旋流逆变器(coiled flow inverter ，CFI)作为用于连续低pH病毒灭活的工具(Klutz, S.等人2015, Journal of Biotechnology 213, 第120–130页)。它提供紧密和确定的停留时间分布，以使分批概念适应连续过程(Klutz, S.等人(2015) Chemical Engineering Research and Design 95, 第22–33页)。另外，允许使用单次使用技术的用于生产治疗性蛋白质的连续过程是尤其令人感兴趣的。

然而，为了根据指南和标准，如GMP (ICH三方协调指南)，FDA (CBER, 2/28/1997指南)和EMEA (CPMP/BWP/268/95, 1996指南或EMEA/CHMP/BWP/398498, 2009指南)，使用用于生产治疗性蛋白质的连续处理，不仅需要确保可靠地去除任何病毒污染，而且这还必须被验证。

因此，对于研究性新药(IND)提交，监管机构要求病毒清除测试，并且这对于过程开发尤其是抗体(单克隆抗体)、重组蛋白和糖蛋白以及组织和血液衍生产品的过程开发特别重要。

换句话说，有效的病毒清除对于所有生物制药生产过程是强制性的，以保证患者的安全性。例如，为了生产单克隆抗体(mAb)，两个正交的专用病毒清除步骤是必需的。每个步骤必须达到对数减少值(LRV)≥4。

因此，本发明的目的是提供一种新颖、简单和廉价的用于验证病毒污染被可靠地清除(即除去或灭活)的解决方案。

本发明通过提供用于验证连续病毒清除的方法来实现该目的，该方法包括以下步骤：

a) 提供待验证的探针，

b) 以有效方式对所述探针加标，

c) 进行病毒清除，

d) 对所述加标探针进行采样，和

e) 分析步骤d)的所述加标探针的样品。

该方法的优点在于它允许简单且廉价地验证连续病毒清除。

如本文所用，术语“验证”是指建立证据或高度保证特定过程、方法或体系将始终如一地产生符合预定验收标准的结果的过程。

例如，在制药工业中，确保适合于生产的过程本身将始终如一地产生预期的结果是非常重要的。

如本文所用，术语“连续”是指在处理探针时连续实施验证的事实。相反，在“分批”方法中，将在给定的时间点验证探针例如产品的完全装填（charge）。换句话说，本文使用的连续过程是指用于串联地实施至少两个过程步骤的过程，由此第二过程步骤在第一过程步骤完成之前开始处理探针。

如本文所用，术语“清除”是指病毒颗粒的去除或病毒颗粒的灭活。

因此，进行病毒清除的步骤导致探针中存在较少的病毒颗粒和/或病毒颗粒不再能够感染细胞，尤其是宿主细胞，即它们被灭活。

如本文所用，术语“探针”是指可能含有病毒的物质。

如本文所用，术语“加标”是指故意大大增加病毒负荷量。