[发明专利]软骨再生用组合物及其制造方法

说明书

本发明涉及包含胚胎软骨组织源性细胞及胚胎软骨组织源性细胞外基质的软骨再生用组合物及其制造方法。根据本发明的软骨再生用组合物无需人工支架可制作用于软骨的适当大小的三维组织，且组合物可由胶形态注入并具有高的涂抹性和粘附性，因此，与注入部位的软骨缺损的大小及模样无关可便于移植，并且呈现与宿主的较高的结合力同时具有成熟的软骨组织的表型，从而具有良好的软骨再生功效的效果。

技术领域

本发明涉及软骨再生用组合物及其制造方法。

背景技术

软骨是仅由单一细胞的软骨和细胞外基质形成的组织。软骨组织的缺点为没有血管和神经，因此受到损伤则难以治愈。此外，软骨细胞由坚固的细胞外基质所环绕，因此，存在一旦受到损伤或退化则难以再生的问题。

为治疗受损的软骨组织，可使用药物治疗剂(镇痛剂、类固醇、非类固醇抗炎药等)、软骨保护剂(透明质酸、氨基葡萄糖、软骨素等)或进行手术处理(关节镜手术、胫骨高位截骨术、关节置换术、全膝关节置换术、骨髓刺激术、骨、软骨组织移植术等)。但是，使用药物治疗剂时，只起到非特异性缓解痛症或炎症反应本身的效果，而软骨保护剂只起到为软骨细胞提供营养或缓解冲击，从而暂时性地保护关节的作用。此外，在整形外科中实施多种临床学手术方法，其代表性的方法是骨髓刺激术(Bone marrow stimulation)和骨软骨组织移植术(Osteochondral graft)。骨髓刺激术是露出受损的软骨下骨(subchondralbone)，并使用包括从骨髓诱导的干细胞的血凝块(blood clot)来填充软骨受损部位的方法，其具有手术较为简便的优点，但是，存在术后再生的并非透明软骨而是纤维软骨的缺点。骨-软骨组织移植术是从患者自身的软骨组织中，提取受体重影响较少部位的骨-软骨结合组织后，将其移植到软骨受损部位的方法，但是，存在受损部位较大时无法实施的缺点。

为了克服这种手术治疗技术的缺点，从外部提供治疗细胞的细胞治疗剂的研究被广泛地展开。最先产品化的技术为自体软骨细胞移植术(Autologous ChondrocytesImplantation，ACI)，是从患者自身的软骨组织中受体重影响较小部位，提取一点健康的软骨并从中将软骨细胞进行分离，且在在体外进行培养之后再注入到受损部位的技术。但是，其具有因两次手术引发的不便及给健康部位的软骨带来损伤的缺点，而且更何况提取的软骨细胞的数量较少，需要培养一定时间，且在培养期间发生失去软骨细胞特性的脱分化现象，且注入的软骨细胞为非均质且因重力导致集中在特定部位，因此存在分布不均匀的缺点。

为克服这一缺点，移植干细胞的研究进展较为活跃，而最近培养同种类脐带血源性间充质干细胞，并移植到软骨部位的移植治疗术已被产品化。除脐带血以外，也积极地研究从骨髓或脂肪组织中分离培养间充质干细胞，治疗软骨损伤的技术，但对于注入的间充质干细胞生存的依据不足，且移植后在活体内的软骨细胞的分化及软骨组织形成效率未被证明，因此，目前的情况是难以期待作为普遍的治疗方法。总而言之，将软骨细胞或干细胞注入软骨损伤部位的细胞治疗剂对细胞的生存、分化、分布的依据不足，且细胞的作用机制也未得以证实，而且细胞治疗剂相互之间的相对有效性并未得到研究，因此，被认定为临床推荐治疗剂的可能性很小。

由于前面所述各种问题，目前为克服细胞治疗剂的活体内分布及分化的缺点，正在使用将多种形态的生物材料(biomaterials)作为支架(scaffolds)传达细胞的技术，进一步地，正在开发在在体外(in vitro)制造三维结构的人工软骨组织(tissue engineeredcartilage)的技术。