[发明专利]用于复杂样品的多属性监测的方法

权利要求书

1.一种用于生物化合物的多属性监测的方法，包括：

(i)使用色谱-光学检测器-高分辨率质谱法表征生物化合物标准品，其中所述表征包括：

(a)使用所述色谱-光学检测器-高分辨率质谱法分离所述生物化合物，鉴定和量化由所述光学检测器生成的峰和由所述高分辨率质谱仪生成的精确质量，将所述精确质量信息存储在库中作为精确质量参考标准信息；

(b)将所述生物化合物标准品暴露于与第一属性相关的第一条件，其中所述第一条件诱导所述生物化合物标准品的至少一个第一化学变化；

(c)使用所述色谱-光学检测器-高分辨率质谱法分离暴露于所述第一条件的所述生物化合物，鉴定和量化由所述光学检测器生成的峰和由所述高分辨率质谱仪生成的精确质量，将来自所述第一条件的所述精确质量与所述精确质量参考标准信息进行比较以鉴定差异；以及将来自与所述第一属性相关的所述第一条件的所述精确质量信息存储在所述库中作为第一目标组分列表；

(ii)确定与所述第一目标化合物列表相关的至少一个质量属性控制极限；

(iii)使用所述色谱-光学检测器-高分辨率质谱法测试生物化合物样品，其中所述测试包括：

(a)使用所述色谱-光学检测器-高分辨率质谱法分离所述生物化合物样品，鉴定和量化由所述光学检测器生成的峰和由所述高分辨率质谱仪生成的精确质量；以及

(b)将所述生物化合物样品峰和精确质量信息的所述鉴定和所述量化与与所述生物化合物标准品和所述第一目标组分列表相关的所述峰和所述精确质量的所述库进行比较；以及

(c)确定是否已超过与所述第一属性相关的所述至少一个质量属性控制极限。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述生物化合物包括蛋白质、肽、寡核苷酸或寡糖。

3.根据权利要求1所述的方法，其中所述色谱-光学检测器-高分辨率质谱法包括液相色谱法、UV检测器和以数据独立采集模式操作的高分辨率质谱仪。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述生物化合物标准品通过使用所述色谱-光学检测器-高分辨率质谱法的单一分析来表征。

5.根据权利要求1所述的方法，其中将所述UV峰的所述洗脱时间、质谱色谱图中所述组分峰的所述洗脱时间或两者调整以适应匹配。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一属性选自由以下项组成的组：脱酰胺评估、异构化评估、糖化评估、高甘露糖评估、甲硫氨酸氧化评估、信号肽评估、异常糖基化评估、CDR色氨酸降解评估、非共有糖基化评估、n-末端焦谷氨酸评估、n-末端截短、c-末端赖氨酸评估、半乳糖基化评估、宿主细胞蛋白评估、突变/错掺评估、羟基赖氨酸评估、硫醚评估、非糖基化重变评估、岩藻糖基化评估、残留蛋白A评估和身份评估。

7.根据权利要求1所述的方法，其中所述生物化合物标准品和所述生物化合物样品的制备和数据采集是相同的。

8.根据权利要求1所述的方法，其中所述第一目标组分列表通过下述各项来表征：保留时间、中性质量、确认碎片、漂移时间、碰撞截面积或它们的组合。

9.根据权利要求1所述的方法，还包括：

将所述生物化合物标准品暴露于与第二属性相关的第二条件，其中所述第二条件诱导所述生物化合物标准品的至少一个第二化学变化；

使用所述色谱-光学检测器-高分辨率质谱法分离暴露于所述第二条件的所述生物化合物，鉴定和量化由所述光学检测器生成的峰和由所述高分辨率质谱仪生成的精确质量，将来自所述第二条件的所述精确质量与所述精确质量参考标准信息进行比较以鉴定差异；以及将来自与所述第二属性相关的所述第二条件的所述精确质量信息存储在所述库中作为第二目标组分列表，

确定与所述第二目标组分列表相关的至少一个质量属性控制极限；

将所述生物化合物样品峰和精确质量信息的所述鉴定和所述量化与与所述第二目标组分列表相关的所述峰和所述精确质量的所述库进行比较；以及

确定是否已超过与所述第二属性相关的所述至少一个质量属性控制极限。