[发明专利]用于生肉和加工肉类产品的肉种鉴定的LC/MS/MS分析

权利要求书

1.一种检测牛肉样品被选自由猪肉、羔羊肉、鸡肉和鸭肉组成的群组的一或多种肉类污染的方法，所述方法包含：

将蛋白水解酶添加至所述样品以将所述样品中除了牛肉以外的任何一或多种肉类的至少一部分溶解为多种肽；和

使用液相色谱串联质谱LC-MS/MS来分析所述多种肽以确定是否存在除了牛肉以外的一或多种肉类，其通过监测具有与选自由以下组成的群组的特定氨基酸序列相关的指定m/z值的至少一个母离子-子离子对跃迁：

i)SEQ ID NO:1，约453/581或453/480的m/z值，针对猪肉；

ii)SEQ ID NO:11，约515/659或515/832的m/z值；或

SEQ ID NO:12，约431/589或431/862的m/z值，针对羔羊肉；

iii)SEQ ID NO:14，约768/923或768/1037的m/z值；或

SEQ ID NO:16，约684/1136或684/1006的m/z值，针对鸡肉；以及

iv)SEQ ID NO:17，约677/1122或677/992的m/z值；或

SEQ ID NO:18，约977/946或977/1442的m/z值，针对鸭肉。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述蛋白水解酶包含胰蛋白酶。

3.根据权利要求1所述的方法，其中在溶解所述样品之前，如下制备所述样品：

a)冷冻所述样品；

b)研磨所述样品；

c)将所述样品的蛋白质提取至提取溶剂中，所述提取溶剂包含tris、脲和硫脲；

d)还原所提取蛋白质中的二硫键；以及

e)阻断所还原蛋白质中的半胱氨酸和其它巯基。

4.一种检测样品中的猪肉的方法，其包含：

将蛋白水解酶添加至所述样品以将所述样品中的任何猪肉的至少一部分溶解为多种肽；以及

使用液相色谱串联质谱LC-MS/MS来分析所述多种肽以确定是否存在猪肉，其通过监测具有与选自由以下组成的群组的特定氨基酸序列相关的指定m/z值的至少一个母离子-子离子对跃迁：

SEQ ID NO:1，约453/581或453/480的m/z值。

5.一种检测样品中的牛肉的方法，其包含：

将蛋白水解酶添加至所述样品以将所述样品中的任何牛肉的至少一部分溶解为多种肽；以及

使用液相色谱串联质谱LC-MS/MS来分析所述多种肽以确定是否存在牛肉，其通过监测具有与选自由以下组成的群组的特定氨基酸序列相关的指定m/z值的至少一个母离子-子离子对跃迁：

SEQ ID NO:7，约595/974或595/215的m/z值。

6.一种检测样品中的羔羊肉的方法，其包含：

将蛋白水解酶添加至所述样品以将所述样品中的任何羔羊肉的至少一部分溶解为多种肽；以及

使用液相色谱串联质谱LC-MS/MS来分析所述多种肽以确定是否存在羔羊肉，其通过监测具有与选自由以下组成的群组的特定氨基酸序列相关的指定m/z值的至少一个母离子-子离子对跃迁：

SEQ ID NO:11，约515/659或515/832的m/z值；或

SEQ ID NO:12，约431/589或431/862的m/z值。

7.一种检测样品中的鸡肉的方法，其包含：

将蛋白水解酶添加至所述样品以将所述样品中的任何鸡肉的至少一部分溶解为多种肽；以及

使用液相色谱串联质谱LC-MS/MS来分析所述多种肽以确定是否存在鸡肉，其通过监测具有与选自由以下组成的群组的特定氨基酸序列相关的指定m/z值的至少一个母离子-子离子对跃迁：

SEQ ID NO:14，约768/923或768/1037的m/z值；或

SEQ ID NO:16，约684/1136或684/1006的m/z值。