[发明专利]通过对健康人血浆蛋白中N-糖蛋白的分析，预测2型糖尿病的发展过程

权利要求书

1.定量分析被调查人附着在人血浆蛋白上的N-聚糖的试剂在制备预测被调查人2型糖尿病发展风险的产品中的应用，其包括以下步骤：

(i)采集健康人的血样；

(ii)从血液样品中分离血浆；

(iii)通过N-糖苷酶的酶水解释放总血浆N-聚糖；

(iv)用2-吡啶硼烷作还原剂，在还原胺化反应中用2-氨基苯甲酰胺衍生N-聚糖，用于N-聚糖荧光标记；

(v)荧光标记的N-聚糖混合物的纯化；

进一步包括步骤：

(vi)使用定量分析技术分离和定量荧光标记的N-聚糖；

(vii)将步骤(vi)中确定的所有N-聚糖的定量百分比用作模型的输入变量：

F(GP1，GP2，…，GP46；D，S)

其中，X，D和S是具有以下含义的F模型的可选参数：

X＝从GP1到GPX分析的N-聚糖的总数；

D＝被调查者的年龄；

S＝调查对象性别，男性为1，女性为0；

通过分析人群的统计数据处理得到模型常数；

(viii)将步骤(vii)中得到的用于被调查者的结果F与阈值T进行比较，阈值T是在相同人群中统计确定的，并且规定未来2型糖尿病(T2D)发展的风险增加；所述N-聚糖和/或N-聚糖基对应于GP1、GP2、…GP46中所包含的结构，定义如下：

其中，*表示异构聚糖结构；

并且，具体步骤如下：

(iv)用2-吡啶硼烷作还原剂，在还原胺化反应中用2-氨基苯甲酰胺衍生N-聚糖，用于N-聚糖荧光标记；

(v)荧光标记的N-聚糖混合物的纯化；

(vi)使用定量分析技术分离和定量荧光标记的N-聚糖；

(vii)将步骤(vi)中预先确定46个N-聚糖GP1-GP46的定量百分比用作模型的输入变量：

F(GP1，GP2，…，GP46；D，S)

其中，D和S是具有以下含义的F模型的可选参数：

D＝被调查者的年龄；

S＝调查对象性别，男性为1，女性为0；

通过分析人群的统计数据处理得到模型常数；以及

(viii)将步骤(vii)中得到的用于被调查者的结果F与阈值T进行比较，阈值T是在相同人群中统计确定的，并且定义了未来2型糖尿病(T2D)发展的风险增加。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，模型F(GP1，GP2，...，GP46；D，S)是以下述方式定义：

F＝241.22–0.08·D+4.90·S+340.97·GP1+148.85·GP2-601.13·GP3-126.73·GP4-3.63·GP5+2.88·GP6+83.43·GP7-3.25·GP8-16.05·GP9-61.37·GP10-0.97·GP11-29.26·GP12+493.12·GP13-26.78·GP14-60.56·GP15-75.38·GP16+6.70·GP17-192.66·GP18+5.29·GP19-122.71·GP20+24.31·GP21+28.30·GP22+24.25·GP23+99.98·GP24-15.34·GP25+88.79·GP26+16.41·GP27+0.30·GP28-33.34·GP29+204.62·GP30+35.04·GP31-49.97·GP32-135.63·GP33+1.28·GP34+223.98·GP35-14.25·GP36+63.65·GP37-2.92·GP38-33.94·GP39-204.07·GP40+181.01·GP41+101.38·GP42-101.40·GP43-113.31·GP44+128.24·GP45-87.65·GP46

其中，阈值T＝-3.627；如果FT，则意味着被调查者未来患2型糖尿病(T2D)的风险增加。