[发明专利]儿童急性淋巴性白血病的血液学病期的辅助判定方法

权利要求书

1.一种辅助儿童急性淋巴性白血病的血液学病期的判定的方法，其包括(1)～(3)的步骤：

(1)获取受试者的生物样品中的威尔姆氏肿瘤-1基因(WT1)的mRNA量的步骤；

(2)获取上述该生物样品中的甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)的mRNA量的步骤；及

(3)基于上述(1)及(2)的步骤中分别获取的WT1 mRNA量与GAPDH mRNA量的比，算出上述辅助判定所需的指标值的步骤。

2.如权利要求1的方法，其中上述(1)的步骤是使用RT-PCR法测量WT1 mRNA量、或接受使用RT-PCR法所测得的WT1 mRNA量的提供的步骤。

3.如权利要求1或2的方法，其中上述(2)的步骤是使用RT-PCR法测量GAPDH mRNA量、或接受使用RT-PCR法所测得的GAPDH mRNA量的提供的步骤。

4.如权利要求1至3中任一项的方法，其中上述(3)的步骤中所获得的指标值是将(1)及(2)的步骤中分别获取的WT1 mRNA量与GAPDH mRNA量的比(WT1 mRNA量/GAPDH mRNA量)进行标准化而获得的值。

5.如权利要求第4的方法，其中上述标准化是借由将WT1 mRNA量与GAPDH mRNA量的比(WT1 mRNA量/GAPDH mRNA量)乘以健康成人1μg RNA中所含的GAPDH mRNA量的平均值2.7×10⁷拷贝/μg RNA而进行。

6.如权利要求1至5中任一项的方法，其进而具有下述步骤：

(4)将上述(3)的步骤中所获得的指标值与预先设定的临界值进行对比，并基于其大小而表示受试者的血液学病期的步骤。

7.如权利要求6的方法，其中上述临界值高于上述指标值的检测下限值。

8.如权利要求6或7的方法，其中儿童急性淋巴性白血病的血液学病期的判定是判别非缓解期与缓解期，并且

上述临界值是分别将处于非缓解期的儿童ALL患者(非缓解期组)与处于缓解期的儿童ALL患者(缓解期组)的两组作为对象并借由统计学解析而求出的值。

9.如权利要求8的方法，其中关于上述临界值，生物样品中的末梢血为220拷贝/μgRNA，骨髓液为1,820拷贝/μg RNA。

10.如权利要求2至9中任一项的方法，其中上述RT-PCR法为2步骤RT-PCR法、或1步骤RT-PCR法。

11.如权利要求2至9中任一项的方法，其中上述RT-PCR法为1步骤RT-PCR法。

12.如权利要求11的方法，其中上述(1)及(2)的步骤中的1步骤RT-PCR法是在受试者的生物样品中同时且在同一容器内连续进行WT1 mRNA及GAPDH mRNA的逆转录反应及延伸反应的方法。

13.如权利要求11或12的方法，其中在上述(1)的步骤的1步骤RT-PCR法中，WT1 mRNA量的测量是使用：

(a)包括包含序列编号2所示的碱基序列的正向PCR引物与包含序列编号3所示的碱基序列的反向PCR引物的引物组，或

(b)包括包含序列编号5所示的碱基序列的正向PCR引物与包含序列编号6所示的碱基序列的反向PCR引物的引物组。