[发明专利]增强用于纯化蛋白质的色谱法的性能的方法

权利要求书

1.一种从包含所需蛋白质的样品中移除污染物的方法，所述方法包括：

(a)使所述样品与(i)一定量的过度饱和的尿囊素、(ii)阳离子聚合物以及(iii)包含6至10个碳原子的脂肪酸接触，从而形成混合物；以及

(b)从所述混合物中移除固体。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述所需蛋白质包含抗体、其结合片段或其一部分。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述样品包含细胞培养收获物。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述细胞培养收获物包含细胞。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的方法，其中在(b)之前，将所述混合物调节至或保持在5.0至5.5的pH范围中。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的方法，其中所述阳离子聚合物选自聚烯丙胺、壳聚糖、聚二烯丙基二甲基氯化铵(pDADMAC)、DEAE-纤维素和DEAE-葡聚糖。

7.根据权利要求1至6中任一项所述的方法，其中所述脂肪酸选自由辛酸、庚酸、庚烯酸、辛烯酸、壬酸、壬烯酸和癸酸构成的组。

8.根据权利要求7所述的方法，其中所述脂肪酸包含辛酸。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的方法，其中所述阳离子聚合物的量在0.001％(w/v)至2％(w/v)的范围内。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述阳离子聚合物的量在0.02％(w/v)至0.1％(w/v)的范围内。

11.根据权利要求1至10中任一项所述的方法，其中所述脂肪酸的浓度为约0.2％(v/v)至约0.6％(v/v)。

12.根据权利要求11所述的方法，其中所述脂肪酸的浓度为约0.40％(v/v)至约0.50％(v/v)。

13.根据权利要求1至12中任一项所述的方法，其中所述尿囊素的量为至少0.9％(w/v)。

14.根据权利要求1至13中任一项所述的方法，其中在(b)中通过包括过滤或沉降的过程来移除所述固体。

15.根据权利要求1至14中任一项所述的方法，其中在(b)中通过使所述混合物与包含正电荷的化学反应性表面接触来移除所述固体。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述化学反应性表面包含二氧化硅。

17.根据权利要求1至16中任一项所述的方法，还包括：(c)通过包括蛋白质亲和色谱、阳离子交换色谱、负电性多峰色谱、阴离子交换色谱、疏水相互作用色谱或固定化金属亲和色谱的过程来纯化所述混合物。

18.根据权利要求1至17中任一项所述的方法，其中所述样品包含选自宿主细胞蛋白、DNA、染色质和聚集体的一种或多种污染物。

19.根据权利要求18所述的方法，其中在(b)之后，所述混合物包含少于20％的在(b)之前存在于所述样品中的所述一种或多种污染物。

20.根据权利要求1至19中任一项所述的方法，其中在(b)之后，所述混合物包含至少90％的在(b)之前存在于所述样品中的所述所需蛋白质。