[发明专利]用于将核酸引入细胞的方法有效
| 申请号： | 201780027949.2 | 申请日： | 2017-05-02 |
| 公开（公告）号： | CN109072256B | 公开（公告）日： | 2022-05-17 |
| 发明（设计）人： | M·朱克;S·维尔德;A·博西奥 | 申请（专利权）人： | 美天施生物科技有限两合公司 |
| 主分类号： | C12N15/87 | 分类号： | C12N15/87 |
| 代理公司： | 北京市金杜律师事务所 11256 | 代理人： | 陈文平 |
| 地址： | 德国贝尔吉*** | 国省代码： | 暂无信息 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 核酸 引入 细胞 方法 | ||
1.一种用至少一种感兴趣的核酸重复转染细胞的方法，其包括向所述细胞中引入以下核酸的步骤
a)SOCS1 mRNA；并且同时
b)编码至少一种感兴趣的多肽的至少一种感兴趣的mRNA；
其中至少步骤b)重复至少一次，
其中所述SOCS1 mRNA和所述至少一种感兴趣的mRNA在其3’端具有包含至少2000个腺嘌呤的聚A尾。
2.根据权利要求1所述的方法，其中所述编码至少一种感兴趣的多肽的所述至少一种感兴趣的mRNA是能够将原代细胞或分化细胞重编程为iPSC的至少一种重编程因子或者能够将体细胞转分化为不同细胞类型的分化因子或者嵌合抗原受体(CAR)。
3.根据权利要求1所述的方法，其中在每种所述mRNA中，0％至25％的核碱基尿嘧啶和/或胞嘧啶是修饰的核碱基。
4.根据权利要求1所述的方法，其中每种所述mRNA是未修饰的mRNA。
5.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少步骤b)重复一次的时间为4小时至48小时。
6.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞是原代细胞。
7.根据权利要求1所述的方法，其中所述细胞是体细胞。
8.根据权利要求6所述的方法，其中所述至少一种感兴趣的mRNA编码重编程因子。
9.根据权利要求7所述的方法，其中所述至少一种感兴趣的mRNA编码用于将体细胞转分化为不同细胞类型的分化因子。
10.一种用至少一种质粒DNA电穿孔细胞的方法，其包括向所述细胞中引入以下核酸的步骤：
a)SOCS1 mRNA，并且同时
b)所述至少一种质粒DNA，
其中所述SOCS1 mRNA在其3’端具有包含至少5000个腺嘌呤的聚A尾。
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