[发明专利]用于核酸序列的特异性靶向的二聚蛋白质

权利要求书

1.一种多肽构建体，其包含第一序列特异性DNA结合蛋白，选自Cas9蛋白或Ago蛋白，连接至第二序列特异性DNA结合蛋白。

2.如权利要求1所述的多肽构建体，其中，第一序列特异性DNA结合蛋白是Cas 9蛋白。

3.如权利要求2所述的多肽构建体，其中，Cas9蛋白是dCas9蛋白。

4.如权利要求2所述的多肽构建体，其中，Cas9蛋白是活性Cas9蛋白。

5.如权利要求2所述的多肽构建体，其中，第一dCas9多肽连接至第二Cas9多肽。

6.如权利要求5所述的多肽构建体，其中，第二Cas9多肽是第二dCas9多肽。

7.如权利要求5所述的多肽构建体，其中，第二Cas9多肽是核酸酶活性Cas9多肽。

8.如权利要求1-7中任一项所述的多肽构建体，其中，第一序列特异性DNA结合蛋白共价连接至第二序列特异性DNA结合蛋白。

9.如权利要求1-8中任一项所述的多肽构建体，其中，第一序列特异性DNA结合蛋白以翻译性融合蛋白的形式共价连接至第二序列特异性DNA结合蛋白。

10.如权利要求1-8中任一项所述的多肽构建体，其中，第一序列特异性DNA结合蛋白通过一个或多个二聚化结构域连接至第二序列特异性DNA结合蛋白。

11.如权利要求5所述的多肽构建体，其中，第一dCas9多肽结合至第一向导RNA，且第二Cas9多肽结合至第二向导RNA，并且第一dCas9多肽通过第一向导RNA与第二向导RNA的相互作用连接至第二Cas9多肽。

12.如权利要求5所述的多肽构建体，其中，第一dCas9多肽和第二Cas9多肽结合至RNA，所述RNA包含：

第一Cas9引导序列；第一tracr RNA序列；第二Cas9引导序列；和第二tracr RNA序列，其中：

第一dCas多肽结合至第一tracr RNA序列，且第二Cas9多肽结合至第二tracr序列；或

第一dCas多肽结合至第二tracr RNA序列，且第二Cas9多肽结合至第一tracr序列，

从而第一dCas多肽和第二Cas多肽通过该RNA结合在一起。

13.如权利要求1-4中任一项所述的多肽构建体，其中，第二序列特异性DNA结合蛋白包含TALE DNA结合结构域或锌指蛋白。

14.如权利要求1所述的多肽构建体，其中，第一序列特异性DNA结合蛋白是Ago蛋白。

15.如权利要求14所述的多肽构建体，其中，第二序列特异性DNA结合蛋白包括Cas9蛋白、Ago蛋白、TALE DNA-结合结构域，或锌指蛋白。

16.一种细胞，其包含如权利要求1-15中任一项所述的多肽构建体。

17.如权利要求16所述的细胞，其中，所述细胞是真核细胞。

18.如权利要求17所述的细胞，其中，所述细胞是人细胞。

19.一种核酸，其编码如权利要求9所述的翻译性融合蛋白。

20.一种细胞，其包含如权利要求19所述的核酸。

21.如权利要求20所述的细胞，其中，所述细胞是真核细胞。