[发明专利]核酸前处理试剂盒和碱基序列分析方法在审
| 申请号: | 201780007394.5 | 申请日: | 2017-01-18 |
| 公开(公告)号: | CN108541272A | 公开(公告)日: | 2018-09-14 |
| 发明(设计)人: | 叶井正树;轴屋博之;大桥铁雄;中村伸;小原收 | 申请(专利权)人: | 株式会社岛津制作所;公益财团法人上总DNA研究所 |
| 主分类号: | C12M1/00 | 分类号: | C12M1/00;C12N15/09;C12Q1/6806 |
| 代理公司: | 北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙) 11277 | 代理人: | 刘新宇;李茂家 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 日本;JP |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 核酸 前处理试剂盒 个体识别 碱基序列 核酸捕捉 生物试样 水系液体 核酸选择性 分离核酸 相分离 分析 | ||
1.一种核酸前处理试剂盒,该核酸前处理试剂盒用于从包含核酸和杂质的生物试样中分离核酸,
所述核酸前处理试剂盒包含:具有任选能封闭的开口的颗粒操作用容器;能与核酸选择性结合的核酸捕捉颗粒;不溶或难溶于水的水相分离用介质;两种以上的水系液体;和个体识别用核酸,
所述两种以上的水系液体中的两种为:用于使所述生物试样中包含的核酸与所述核酸捕捉颗粒结合的核酸捕捉液;和用于回收结合在所述核酸捕捉颗粒表面的核酸的核酸回收液,
至少所述水相分离用介质和所述核酸回收液装填在所述颗粒操作用容器内,
所述个体识别用核酸包含在所述两种以上的水系液体中的至少一种中、或者结合在所述核酸捕捉颗粒的表面,
所述个体识别用核酸的碱基序列包含由与所述生物试样中包含的核酸非互补的碱基序列构成的识别序列。
2.根据权利要求1所述的核酸前处理试剂盒,其中,所述水相分离用介质和所述水系液体全部装填在所述颗粒操作用容器内。
3.根据权利要求1所述的核酸前处理试剂盒,其还包含核酸捕捉操作用容器,
所述核酸捕捉液装填在所述核酸捕捉操作用容器中。
4.根据权利要求1~3中任一项所述的核酸前处理试剂盒,其中,所述核酸捕捉颗粒包含在所述核酸捕捉液中。
5.根据权利要求1~4中任一项所述的核酸前处理试剂盒,其中,所述个体识别用核酸包含在核酸回收液中。
6.根据权利要求1~5中任一项所述的核酸前处理试剂盒,其中,在所述颗粒操作用容器上附着有能从容器外部识别的识别信息,
附着在所述颗粒操作用容器上的所述识别信息与所述识别序列的碱基序列相关联。
7.根据权利要求4所述的核酸前处理试剂盒,其中,所述个体识别用核酸包含在所述核酸捕捉液中、或者结合在所述核酸捕捉颗粒的表面,
在所述核酸捕捉操作用容器上附着有能从容器外部识别的识别信息,
附着在所述核酸捕捉操作用容器上的所述识别信息与所述识别序列的碱基序列相关联。
8.根据权利要求7所述的核酸前处理试剂盒,其中,在所述颗粒操作用容器上附着有能从容器外部识别的识别信息,
附着在所述核酸捕捉操作用容器上的所述识别信息能与附着在所述颗粒操作用容器上的所述识别信息相对应。
9.根据权利要求6或8所述的核酸前处理试剂盒,其中,所述颗粒操作用容器的识别信息附着于所述核酸回收液的装填部位。
10.根据权利要求6~9中任一项所述的核酸前处理试剂盒,其中,所述识别信息以能利用光学方法或电磁方法识别的方式附着。
11.根据权利要求1~10中任一项所述的核酸前处理试剂盒,其中,所述水相分离用介质为凝胶。
12.根据权利要求1~11中任一项所述的核酸前处理试剂盒,其中,所述核酸捕捉颗粒为磁性颗粒。
13.根据权利要求1~12中任一项所述的核酸前处理试剂盒,其中,所述核酸回收液是用于使结合在所述核酸捕捉颗粒表面的核酸从颗粒表面洗脱的核酸洗脱液。
14.根据权利要求1~13中任一项所述的核酸前处理试剂盒,其中,所述颗粒操作用容器以能在所述核酸回收液的装填部位的附近分离的方式构成。
15.根据权利要求1~14中任一项所述的核酸前处理试剂盒,其中,所述个体识别用核酸在所述识别序列的3’侧和5’侧中的至少任一侧包含与所述生物试样中包含的核酸互补的碱基序列。
16.一种碱基序列分析方法,其包括下述步骤:
使用权利要求1~15中任一项所述的试剂盒,在所述核酸回收液中回收生物试样中的核酸和所述个体识别用核酸的步骤;和
对所述回收的核酸的碱基序列进行分析的步骤,
在碱基序列的分析中,除了生物试样中的核酸的碱基序列之外,还对所述个体识别用核酸的识别序列的碱基序列进行分析,
对通过碱基序列分析得到的识别序列部分的碱基序列与所述试剂盒中包含的个体识别用核酸的识别序列的碱基序列是否一致进行对照。
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